技术专栏

1. 为什么ELISA检测组织匀浆上清以及细胞提取液需要BCA总蛋白定量？

答：① 减少误差：组织匀浆以及细胞提取液处理过程中的样本量和蛋白提取效率可能存在误差，BCA定量能确保样品中总蛋白浓度一致，从而提高ELISA结果的准确性；② 提高实验可靠性：BCA定量确保每个样品中总蛋白量相同，使得ELISA结果具有可比性和可靠性；③ 期刊要求：高水平期刊通常要求在实验中报告蛋白定量数据，以确保结果的科学性和重复性。因此，建议在进行ELISA实验时，先进行BCA总蛋白定量实验。

2. 检测组织匀浆上清以及细胞提取液时，是否需要将组织匀浆上清以及细胞提取液稀释到相同的浓度(ug/ul)再上样？

答：检测组织匀浆上清以及细胞提取液时，不需要将其稀释到相同浓度（ug/ul）再上样。只需按推荐的方式处理组织匀浆和细胞提取液并进行BCA总蛋白定量实验。ELISA测得的靶标浓度应与总蛋白浓度的比值进行校正，最终结果以ELISA试剂盒标准品所标示的质量单位/mg prot（pg/mg prot或ng/mg prot等）。