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说明书下载产品属性/ Product Details
| 产品名称 | Mouse HB(Hemoglobin) ELISA Kit | 反应种属 | Mouse |
| Uniprot ID | N/A | 别称 | HB |
| 检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 93.75 ng/mL |
| 标准品 | 10000ng/mL | 检测范围 | 156.25-10000ng/mL |
| 样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples；Sample Volume=100μL | ||
| 检测时间 | 3.5小时 | 研究领域 | Tumor immunity; |
| 测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗小鼠HB抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的小鼠HB会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠HB抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗小鼠HB抗体与结合在包被抗体上的小鼠HB结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，小鼠HB浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中小鼠HB的浓度。 | ||
技术数据/ Technical Data
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等)，标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
| (ng/mL) | OD | Corrected |
|---|---|---|
| 10000.00 | 2.484 | 2.430 |
| 5000.00 | 1.604 | 1.550 |
| 2500.00 | 0.911 | 0.857 |
| 1250.00 | 0.476 | 0.422 |
| 625.00 | 0.267 | 0.213 |
| 312.50 | 0.161 | 0.107 |
| 156.25 | 0.110 | 0.056 |
| 0.00 | 0.054 | 0.000 |
精密度
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Mean(ng/mL) | 309.04 | 2229.42 | 3693.91 | 241.09 | 2455.68 | 2781.18 |
| Standard deviation | 9.11 | 109.69 | 217.75 | 12.71 | 94.60 | 267.67 |
| C V (%) | 3.40 | 5.32 | 2.95 | 6.32 | 6.17 | 6.90 |
回收率
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围和平均回收率。
| Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
|---|---|---|
| Serum (n=8) | 83-95 | 89 |
| EDTA plasma (n=8) | 90-105 | 97 |
| Cell culture media (n=8) | 80-95 | 87 |
线性
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍，4倍，8倍，16倍做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
|---|---|---|---|---|
| 1:2 | Range (%) | 93-102 | 87-98 | 91-99 |
| Average (%) | 93 | 94 | 98 | |
| 1:4 | Range (%) | 81-96 | 92-104 | 83-89 |
| Average (%) | 92 | 104 | 84 | |
| 1:8 | Range (%) | 93-106 | 82-96 | 88-104 |
| Average (%) | 103 | 94 | 104 | |
| 1:16 | Range (%) | 82-95 | 95-102 | 97-103 |
| Average (%) | 83 | 97 | 102 |
检测流程/ Assay Procedures
