产品名称 | Mouse G6PD(Glucose 6 Phosphate Dehydrogenase) ELISA Kit | 反应种属 | Mouse |
Uniprot ID | Q8CFX1 | 别称 | G6pdx, G6pd-1 |
检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 0.94 μg/mL |
标准品 | 100μg/mL | 检测范围 | 1.56-100μg/mL |
样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples;Sample Volume=100μL | ||
检测时间 | 3.5小时 | 研究领域 | Signal transduction;Infection immunity;Immune molecule; |
测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗小鼠 G6PD抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的小鼠 G6PD会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠 G6PD抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗小鼠 G6PD抗体与结合在包被抗体上的小鼠 G6PD结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,小鼠 G6PD浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中小鼠 G6PD的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(μg/mL) | OD | Corrected |
---|---|---|
100.00 | 2.352 | 2.311 |
50.00 | 1.550 | 1.509 |
25.00 | 0.947 | 0.906 |
12.50 | 0.515 | 0.474 |
6.25 | 0.260 | 0.219 |
3.13 | 0.145 | 0.104 |
1.57 | 0.084 | 0.043 |
0.00 | 0.041 | 0.000 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(μg/mL) | 1.67 | 23.04 | 40.28 | 3.42 | 16.76 | 39.55 |
Standard deviation | 0.15 | 0.98 | 1.80 | 0.16 | 1.24 | 1.79 |
C V (%) | 2.95 | 5.80 | 7.32 | 4.24 | 6.60 | 6.54 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 85-99 | 92 |
EDTA plasma (n=8) | 80-92 | 85 |
Cell culture media (n=8) | 80-90 | 84 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 88-102 | 81-94 | 86-97 |
Average (%) | 96 | 84 | 92 | |
1:4 | Range (%) | 96-107 | 81-94 | 80-94 |
Average (%) | 106 | 90 | 89 | |
1:8 | Range (%) | 89-103 | 80-90 | 90-99 |
Average (%) | 93 | 84 | 95 | |
1:16 | Range (%) | 80-95 | 83-95 | 87-103 |
Average (%) | 80 | 85 | 100 |