产品名称 | Human ApoA4(Apolipoprotein A4) ELISA Kit | 反应种属 | Human |
Uniprot ID | P06727 | 别称 | APOA4, Apolipoprotein A-IV, ApoA-IV,ApoAIV,apoA4, |
检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 2.81 ng/mL |
标准品 | 300ng/mL | 检测范围 | 4.69-300ng/mL |
样品类型 | Serum;Sample Volume=100μL | ||
检测时间 | 3.5小时 | 研究领域 | Cytokine;Hematology; |
测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人ApoA4抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的人ApoA4会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人ApoA4抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人ApoA4抗体与结合在包被抗体上的人ApoA4结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,人ApoA4浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中人ApoA4的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(ng/mL) | OD | Corrected |
---|---|---|
300.00 | 2.377 | 2.338 |
150.00 | 1.591 | 1.552 |
75.00 | 0.886 | 0.847 |
37.50 | 0.386 | 0.347 |
18.75 | 0.231 | 0.192 |
9.38 | 0.122 | 0.083 |
4.69 | 0.085 | 0.046 |
0.00 | 0.039 | 0.000 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(ng/mL) | 6.19 | 37.98 | 103.17 | 6.03 | 58.66 | 100.29 |
Standard deviation | 0.40 | 3.17 | 7.45 | 0.31 | 2.42 | 6.58 |
C V (%) | 5.76 | 5.61 | 2.89 | 4.94 | 6.10 | 6.74 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 80-95 | 87 |
EDTA plasma (n=8) | 90-105 | 97 |
Cell culture media (n=8) | 86-99 | 92 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 93-102 | 85-96 | 93-102 |
Average (%) | 97 | 86 | 94 | |
1:4 | Range (%) | 87-96 | 85-96 | 86-98 |
Average (%) | 89 | 95 | 91 | |
1:8 | Range (%) | 85-98 | 96-105 | 83-96 |
Average (%) | 89 | 98 | 84 | |
1:16 | Range (%) | 91-103 | 81-93 | 95-104 |
Average (%) | 92 | 81 | 96 |