产品名称 | Human SOD1(Superoxide Dismutase 1, Soluble) ELISA Kit | 反应种属 | Human |
Uniprot ID | P00441 | 别称 | ALS, ALS1, IPOA, Superoxide dismutase [Cu-Zn] |
检测方法 | 竞争法 | 灵敏度 | 37.5 pg/mL |
标准品 | 4000pg/mL | 检测范围 | 62.5-4000pg/mL |
样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples;Sample Volume=50μL | ||
检测时间 | 1.5小时 | 研究领域 | Signal transduction; |
测试原理 | 本试剂盒采用竞争ELISA法。用人SOD1抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的人SOD1与包被的人SOD1竞争生物素标记的抗人SOD1单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,人SOD1浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中人SOD1的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(pg/mL) | OD | |
---|---|---|
4000.00 | 0.270 | |
2000.00 | 0.433 | |
1000.00 | 0.673 | |
500.00 | 0.990 | |
250.00 | 1.283 | |
125.00 | 1.603 | |
62.50 | 1.873 | |
0.00 | 2.695 | 0.000 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(pg/mL) | 103.62 | 681.26 | 1669.44 | 209.46 | 843.56 | 1829.39 |
Standard deviation | 2.97 | 39.49 | 57.49 | 9.84 | 50.11 | 55.07 |
C V (%) | 7.24 | 3.42 | 4.69 | 4.09 | 5.12 | 4.60 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 80-95 | 87 |
EDTA plasma (n=8) | 82-97 | 89 |
Cell culture media (n=8) | 95-108 | 101 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 95-103 | 85-94 | 82-90 |
Average (%) | 96 | 91 | 86 | |
1:4 | Range (%) | 87-98 | 85-94 | 85-92 |
Average (%) | 93 | 87 | 86 | |
1:8 | Range (%) | 85-92 | 87-103 | 90-96 |
Average (%) | 90 | 91 | 90 | |
1:16 | Range (%) | 80-96 | 81-95 | 80-102 |
Average (%) | 83 | 87 | 84 |