产品名称 | Human OXB(Orexin B) ELISA Kit | 反应种属 | Human |
Uniprot ID | O43612(70~97aa) | 别称 | Hypocretin-2,HCRT2,Orexin-B, Orexin B |
检测方法 | 竞争法 | 灵敏度 | 0.24 ng/mL |
标准品 | 25ng/mL | 检测范围 | 0.4-25ng/mL |
样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples;Sample Volume=50μL | ||
检测时间 | 1.5小时 | 研究领域 | Kidney diseases |
测试原理 | 本试剂盒采用竞争ELISA法。用人OXB抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的人OXB与包被的人OXB竞争生物素标记的抗人OXB单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,人OXB浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中人OXB的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(ng/mL) | OD | |
---|---|---|
25.00 | 0.190 | |
12.50 | 0.367 | |
6.25 | 0.572 | |
3.13 | 0.882 | |
1.57 | 1.224 | |
0.79 | 1.606 | |
0.40 | 1.866 | |
0.00 | 2.497 | 0.000 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(ng/mL) | 0.83 | 3.78 | 9.04 | 0.38 | 5.57 | 8.87 |
Standard deviation | 0.01 | 0.24 | 0.35 | 0.05 | 0.31 | 0.51 |
C V (%) | 2.56 | 5.84 | 5.23 | 3.32 | 4.03 | 7.08 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 87-99 | 93 |
EDTA plasma (n=8) | 82-98 | 90 |
Cell culture media (n=8) | 87-93 | 90 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 81-94 | 82-94 | 88-95 |
Average (%) | 82 | 85 | 91 | |
1:4 | Range (%) | 87-105 | 82-94 | 98-107 |
Average (%) | 88 | 91 | 102 | |
1:8 | Range (%) | 80-95 | 95-102 | 90-99 |
Average (%) | 85 | 96 | 91 | |
1:16 | Range (%) | 96-105 | 87-103 | 88-97 |
Average (%) | 97 | 103 | 97 |