产品名称 | Rat α-CTx(Alpha Crosslaps) ELISA Kit | 反应种属 | Rat |
Uniprot ID | N/A | 别称 | a-CTXI, aCTX-I, A-Cr, Type I Collagen C-Telopeptide-Related Fraction |
检测方法 | 竞争法 | 灵敏度 | 56.25 pg/mL |
标准品 | 6000pg/mL | 检测范围 | 93.75-6000pg/mL |
样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples;Sample Volume=50μL | ||
检测时间 | 1.5小时 | 研究领域 | Immune molecule; |
测试原理 | 本试剂盒采用竞争ELISA法。用大鼠α-CTx抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的大鼠α-CTx与包被的大鼠α-CTx竞争生物素标记的抗大鼠α-CTx单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,大鼠α-CTx浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中大鼠α-CTx的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(pg/mL) | OD | Corrected |
---|---|---|
6000.00 | 0.180 | 0.000 |
3000.00 | 0.358 | 0.000 |
1500.00 | 0.597 | 0.000 |
750.00 | 0.842 | 0.000 |
375.00 | 1.167 | 0.000 |
187.50 | 1.526 | 0.000 |
93.75 | 1.771 | 0.000 |
0.00 | 2.531 | 0.000 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(pg/mL) | 88.95 | 1466.14 | 2333.91 | 79.06 | 1319.11 | 2250.97 |
Standard deviation | 1.53 | 51.43 | 131.91 | 19.88 | 42.05 | 101.78 |
C V (%) | 3.62 | 5.43 | 3.63 | 5.63 | 4.05 | 5.74 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 80-92 | 86 |
EDTA plasma (n=8) | 80-95 | 86 |
Cell culture media (n=8) | 80-96 | 88 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 85-92 | 88-101 | 87-96 |
Average (%) | 90 | 92 | 89 | |
1:4 | Range (%) | 89-96 | 85-93 | 92-105 |
Average (%) | 91 | 86 | 97 | |
1:8 | Range (%) | 80-98 | 89-97 | 89-102 |
Average (%) | 85 | 93 | 92 | |
1:16 | Range (%) | 81-92 | 85-94 | 92-101 |
Average (%) | 85 | 90 | 94 |