产品名称 | Rat APLN(Apelin) ELISA Kit | 反应种属 | Rat |
Uniprot ID | Q9R0R3 | 别称 | APEL, XNPEP2 |
检测方法 | 竞争法 | 灵敏度 | 46.88 pg/mL |
标准品 | 5000pg/mL | 检测范围 | 78.13-5000pg/mL |
样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples;Sample Volume=50μL | ||
检测时间 | 1.5小时 | 研究领域 | CD & Adhesion molecule;Tumor immunity;Infection immunity;Immune molecule; |
测试原理 | 本试剂盒采用竞争ELISA法。用大鼠APLN抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的大鼠APLN与包被的大鼠APLN竞争生物素标记的抗大鼠APLN单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,大鼠APLN浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中大鼠APLN的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(pg/mL) | OD | Corrected |
---|---|---|
5000.00 | 0.191 | 0.000 |
2500.00 | 0.329 | 0.000 |
1250.00 | 0.548 | 0.000 |
625.00 | 0.879 | 0.000 |
312.50 | 1.300 | 0.000 |
156.25 | 1.757 | 0.000 |
78.13 | 2.066 | 0.000 |
0.00 | 2.546 | 0.000 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(pg/mL) | 130.04 | 791.90 | 1607.24 | 253.63 | 906.72 | 1488.41 |
Standard deviation | 11.95 | 51.51 | 81.85 | 5.08 | 53.05 | 86.44 |
C V (%) | 4.27 | 3.53 | 4.46 | 3.50 | 5.22 | 4.72 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 85-97 | 91 |
EDTA plasma (n=8) | 85-97 | 91 |
Cell culture media (n=8) | 83-99 | 95 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 87-98 | 91-102 | 94-106 |
Average (%) | 96 | 95 | 100 | |
1:4 | Range (%) | 85-92 | 91-102 | 81-97 |
Average (%) | 87 | 96 | 88 | |
1:8 | Range (%) | 80-96 | 89-97 | 88-102 |
Average (%) | 82 | 96 | 96 | |
1:16 | Range (%) | 89-100 | 86-102 | 85-93 |
Average (%) | 93 | 98 | 92 |