产品名称 | Rat AP13(Apelin 13) ELISA Kit | 反应种属 | Rat |
Uniprot ID | Q9R0R3 | 别称 | AP13 |
检测方法 | 竞争法 | 灵敏度 | 0.1 ng/mL |
标准品 | 10ng/mL | 检测范围 | 0.16-10ng/mL |
样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples;Sample Volume=50μL | ||
检测时间 | 1.5小时 | 研究领域 | Signal transduction; |
测试原理 | 本试剂盒采用竞争ELISA法。用大鼠AP13抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的大鼠AP13与包被的大鼠AP13竞争生物素标记的抗大鼠AP13单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,大鼠AP13浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中大鼠AP13的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(ng/mL) | OD | Corrected |
---|---|---|
10.00 | 0.261 | 0.000 |
5.00 | 0.361 | 0.000 |
2.50 | 0.555 | 0.000 |
1.25 | 0.816 | 0.000 |
0.63 | 1.111 | 0.000 |
0.32 | 1.506 | 0.000 |
0.16 | 1.820 | 0.000 |
0.00 | 2.484 | 0.000 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(ng/mL) | 0.11 | 2.10 | 4.12 | 0.34 | 2.08 | 3.95 |
Standard deviation | 0.02 | 0.10 | 0.21 | 0.01 | 0.10 | 0.15 |
C V (%) | 5.98 | 5.41 | 3.49 | 2.99 | 7.25 | 4.58 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 88-99 | 93 |
EDTA plasma (n=8) | 86-98 | 92 |
Cell culture media (n=8) | 82-98 | 87 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 83-94 | 85-93 | 87-99 |
Average (%) | 90 | 91 | 95 | |
1:4 | Range (%) | 80-92 | 85-93 | 82-96 |
Average (%) | 81 | 86 | 86 | |
1:8 | Range (%) | 86-102 | 80-96 | 85-96 |
Average (%) | 96 | 90 | 91 | |
1:16 | Range (%) | 87-103 | 93-106 | 87-101 |
Average (%) | 87 | 103 | 90 |