产品名称 | MF-Mouse IL-18(Interleukin 18) ELISA Kit | 反应种属 | Mouse |
Uniprot ID | P70380 | 别称 | Iboctadekin, IFN-gamma-inducing factor, IGIF, IGIFIL-1 gamma, IL18, IL-18, IL-18MGC12320, IL-1F4, IL1F4iboctadekin, IL-1g, Interferon gamma-inducing factor, interleukin 18 (interferon-gamma-inducing factor), Interleukin-1 gamma, interleukin-18 |
检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 4.69 pg/mL |
标准品 | 500pg/mL | 检测范围 | 7.81-500pg/mL |
样品类型 | 血清,血浆,组织匀浆及其它生物样品;上样量:25μL | ||
检测时间 | 3小时 | 研究领域 | Cancer, Immunology; |
测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗小鼠IL-18抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的小鼠IL-18会与包被抗体以及生物素化的抗小鼠IL-18抗体结合,游离的成分被洗去。然后加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,抗小鼠IL-18抗体与结合在包被抗体上的小鼠IL-18结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,小鼠IL-18浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中小鼠IL-18的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(pg/mL) | OD | Corrected |
---|---|---|
500.00 | 2.781 | 2.730 |
250.00 | 1.872 | 1.821 |
125.00 | 1.159 | 1.108 |
62.50 | 0.675 | 0.624 |
31.25 | 0.355 | 0.304 |
15.63 | 0.202 | 0.151 |
7.81 | 0.122 | 0.071 |
0.00 | 0.051 | 0.000 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
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Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(pg/mL) | 12.72 | 25.28 | 20.580 | 29.78 | 29.970 | 13.710 |
Standard deviation | 19.08 | 26.68 | 15.31 | 22.72 | 25.84 | 28.75 |
C V (%) | 8.41 | 4.89 | 5.79 | 7.02 | 6.79 | 6.26 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 103-108 | 106 |
EDTA plasma (n=8) | 88-112 | 93 |
Cell culture media (n=8) | 86-115 | 101 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 87-96 | 95-103 | 87-96 |
Average (%) | 92 | 98 | 91 | |
1:4 | Range (%) | 92-105 | 87-98 | 85-98 |
Average (%) | 104 | 92 | 87 | |
1:8 | Range (%) | 89-102 | 85-92 | 89-102 |
Average (%) | 99 | 92 | 93 | |
1:16 | Range (%) | 92-101 | 80-96 | 85-98 |
Average (%) | 95 | 95 | 88 |