产品名称 | MF-Mouse IL-10(Interleukin 10) ELISA Kit | 反应种属 | Mouse |
Uniprot ID | P18893 | 别称 | CSIF, CSIFMGC126450, Cytokine synthesis inhibitory factor, GVHDS, IL10, IL-10, IL10A, IL-10MGC126451, interleukin 10, interleukin-10, TGIF |
检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 1.88 pg/mL |
标准品 | 200pg/mL | 检测范围 | 3.13-200pg/mL |
样品类型 | 血清,血浆,组织匀浆及其它生物样品;上样量:25μL | ||
检测时间 | 3小时 | 研究领域 | Cancer, Immunology; |
测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗小鼠IL-10抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的小鼠IL-10会与包被抗体以及生物素化的抗小鼠IL-10抗体结合,游离的成分被洗去。然后加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,抗小鼠IL-10抗体与结合在包被抗体上的小鼠IL-10结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,小鼠IL-10浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中小鼠IL-10的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(pg/mL) | OD | Corrected |
---|---|---|
200.00 | 2.489 | 2.468 |
100.00 | 1.761 | 1.740 |
50.00 | 1.193 | 1.172 |
25.00 | 0.548 | 0.527 |
12.50 | 0.304 | 0.283 |
6.25 | 0.176 | 0.155 |
3.13 | 0.091 | 0.070 |
0.00 | 0.021 | 0.000 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(pg/mL) | 16.11 | 25.37 | 24.460 | 21.15 | 25.340 | 14.160 |
Standard deviation | 22.83 | 12.73 | 27.80 | 26.32 | 11.86 | 13.26 |
C V (%) | 7.52 | 3.15 | 7.16 | 9.43 | 2.92 | 7.33 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 90-109 | 108 |
EDTA plasma (n=8) | 90-103 | 90 |
Cell culture media (n=8) | 86-114 | 100 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 95-103 | 88-98 | 95-103 |
Average (%) | 97 | 98 | 101 | |
1:4 | Range (%) | 87-98 | 87-103 | 80-97 |
Average (%) | 88 | 91 | 91 | |
1:8 | Range (%) | 85-92 | 89-97 | 93-102 |
Average (%) | 87 | 96 | 94 | |
1:16 | Range (%) | 80-96 | 85-94 | 87-103 |
Average (%) | 82 | 89 | 98 |