产品名称 | Human ADP/Acrp30(Adiponectin) ELISA Kit | 反应种属 | Human |
Uniprot ID | N/A | 别称 | GBP28, ACDC, APM1, ADPN, AdipoQ, ADIPQTL1 |
检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 18.75 pg/mL |
标准品 | 2000pg/mL | 检测范围 | 31.25-2000pg/mL |
样品类型 | Serum, Plasma and Other biological fluids,Sample Volume= 100μL | ||
检测时间 | 3.5小时 | 研究领域 | Cardiovascular, Signaling transduction, Cell biology, Neuroscience, Cancer, Immunology, Metabolism |
测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人 ADP/Acrp30抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的人 ADP/Acrp30会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人 ADP/Acrp30抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人 ADP/Acrp30抗体与结合在包被抗体上的人 ADP/Acrp30结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,人 ADP/Acrp30浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中人 ADP/Acrp30的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(pg/mL) | OD | Corrected |
---|---|---|
2000.00 | 2.358 | 2.339 |
1000.00 | 1.786 | 1.767 |
500.00 | 1.014 | 0.996 |
250.00 | 0.600 | 0.582 |
125.00 | 0.263 | 0.245 |
62.50 | 0.151 | 0.133 |
31.25 | 0.076 | 0.058 |
0.00 | 0.018 | 0.000 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(pg/mL) | 0.19 | 2.42 | 3.38 | 0.24 | 1.71 | 3.82 |
Standard deviation | 0.01 | 0.10 | 0.19 | 0.01 | 0.11 | 0.25 |
C V (%) | 5.73 | 5.15 | 4.55 | 4.37 | 6.02 | 4.74 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 88-103 | 95 |
EDTA plasma (n=8) | 92-106 | 99 |
Cell culture media (n=8) | 90-105 | 97 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 88-103 | 95-106 | 93-102 |
Average (%) | 90 | 106 | 102 | |
1:4 | Range (%) | 83-94 | 95-106 | 90-99 |
Average (%) | 89 | 96 | 96 | |
1:8 | Range (%) | 92-105 | 88-103 | 95-106 |
Average (%) | 101 | 90 | 100 | |
1:16 | Range (%) | 89-97 | 81-98 | 87-101 |
Average (%) | 97 | 89 | 100 |