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说明书下载产品属性/ Product Details
| 产品名称 | Human ALPL(Alkaline Phosphatase, Liver/Bone/Kidney) ELISA Kit | 反应种属 | Human |
| Uniprot ID | P05186 | 别称 | Akp2; Alkaline phosphatase liver/bone/kidney isozyme; alkaline phosphatase, liver/bone/kidney; alkaline phosphatase, tissue-nonspecific isozyme; alkaline phosphomonoesterase; ALPL; APTNAP; AP-TNAP; EC 3.1.3.1; FLJ40094; FLJ93059; glycerophosphatase; HOPS; liver/bone/kidney-type alkaline phosphatase; MGC161443; tissue-nonspecific ALP; TNAP; TNSALP; TNSALPMGC167935; Bone Alkaline Phosphatase; BALP |
| 检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 46.88 pg/mL |
| 标准品 | 5000pg/mL | 检测范围 | 78.13-5000pg/mL |
| 样品类型 | Serum；Sample Volume=100μL | ||
| 检测时间 | 3.5小时 | 研究领域 | Metabolic pathway; |
| 测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人ALPL抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的人ALPL会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人ALPL抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人ALPL抗体与结合在包被抗体上的人ALPL结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，人ALPL浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中人ALPL的浓度。 | ||
技术数据/ Technical Data
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等)，标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
| (pg/mL) | OD | Corrected |
|---|---|---|
| 5000.00 | 2.458 | 2.435 |
| 2500.00 | 1.602 | 1.579 |
| 1250.00 | 0.936 | 0.913 |
| 625.00 | 0.417 | 0.394 |
| 312.50 | 0.208 | 0.185 |
| 156.25 | 0.110 | 0.087 |
| 78.13 | 0.058 | 0.035 |
| 0.00 | 0.023 | 0.000 |
精密度
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Mean(pg/mL) | 152.02 | 647.49 | 1934.89 | 124.40 | 910.63 | 1644.24 |
| Standard deviation | 4.12 | 37.40 | 88.71 | 4.34 | 57.94 | 114.11 |
| C V (%) | 5.10 | 3.94 | 3.69 | 3.42 | 6.69 | 6.35 |
回收率
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围和平均回收率。
| Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
|---|---|---|
| Serum (n=8) | 82-95 | 88 |
| EDTA plasma (n=8) | 94-107 | 100 |
| Cell culture media (n=8) | 94-105 | 98 |
线性
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍，4倍，8倍，16倍做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
|---|---|---|---|---|
| 1:2 | Range (%) | 80-91 | 85-94 | 85-92 |
| Average (%) | 90 | 88 | 88 | |
| 1:4 | Range (%) | 96-105 | 87-96 | 80-96 |
| Average (%) | 97 | 95 | 86 | |
| 1:8 | Range (%) | 80-92 | 82-95 | 95-102 |
| Average (%) | 83 | 83 | 97 | |
| 1:16 | Range (%) | 91-103 | 81-93 | 87-98 |
| Average (%) | 102 | 90 | 88 |
检测流程/ Assay Procedures
