产品名称 | Human AQP-1(Aquaporin 1) ELISA Kit | 反应种属 | Human |
Uniprot ID | P29972 | 别称 | AQP1, AQP-CHIP, CHIP28, CO |
检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 75 pg/mL |
标准品 | 8000pg/mL | 检测范围 | 125-8000pg/mL |
样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples;Sample Volume=100μL | ||
检测时间 | 3.5小时 | 研究领域 | Hematology;Cardiovascular biology; |
测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人AQP-1抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的人AQP-1会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人AQP-1抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人AQP-1抗体与结合在包被抗体上的人AQP-1结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,人AQP-1浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中人AQP-1的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(pg/mL) | OD | Corrected |
---|---|---|
8000.00 | 2.440 | 2.418 |
4000.00 | 1.589 | 1.567 |
2000.00 | 0.947 | 0.925 |
1000.00 | 0.439 | 0.417 |
500.00 | 0.212 | 0.190 |
250.00 | 0.102 | 0.080 |
125.00 | 0.057 | 0.035 |
0.00 | 0.022 | 0.000 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(pg/mL) | 229.04 | 1540.16 | 3756.08 | 169.34 | 1682.12 | 2537.71 |
Standard deviation | 7.73 | 72.14 | 145.67 | 7.04 | 65.31 | 145.82 |
C V (%) | 6.79 | 4.96 | 2.98 | 3.70 | 3.04 | 7.20 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 85-97 | 91 |
EDTA plasma (n=8) | 80-94 | 87 |
Cell culture media (n=8) | 91-105 | 98 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 85-101 | 88-97 | 89-97 |
Average (%) | 99 | 92 | 90 | |
1:4 | Range (%) | 80-96 | 88-97 | 88-104 |
Average (%) | 92 | 88 | 95 | |
1:8 | Range (%) | 80-98 | 91-103 | 87-96 |
Average (%) | 89 | 97 | 92 | |
1:16 | Range (%) | 93-102 | 86-92 | 85-93 |
Average (%) | 100 | 92 | 92 |