产品名称 | Human CRP(C-Reactive Protein) ELISA Kit | 反应种属 | Human |
Uniprot ID | P02741 | 别称 | C-Reactive Protein, CRP, PTX1 |
检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 0.47 ng/mL |
标准品 | 50ng/mL | 检测范围 | 0.78-50ng/mL |
样品类型 | Serum, Plasma and Other biological fluids,Sample Volume= 100μL | ||
检测时间 | 3.5小时 | 研究领域 | Signaling transduction, Cell biology, Cancer, Immunology, Metabolism |
测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人 CRP抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的人 CRP会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人 CRP抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人 CRP抗体与结合在包被抗体上的人 CRP结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,人 CRP浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中人 CRP的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(ng/mL) | OD | Corrected |
---|---|---|
50.00 | 2.833 | 2.823 |
25.00 | 1.780 | 1.770 |
12.50 | 1.023 | 1.013 |
6.25 | 0.596 | 0.586 |
3.13 | 0.310 | 0.300 |
1.56 | 0.141 | 0.131 |
0.78 | 0.071 | 0.061 |
0.00 | 0.010 | 0.000 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(ng/mL) | 0.55 | 4.23 | 8.23 | 0.42 | 3.79 | 9.12 |
Standard deviation | 0.03 | 0.17 | 0.37 | 0.02 | 0.23 | 0.47 |
C V (%) | 3.41 | 5.93 | 2.81 | 4.46 | 3.44 | 7.86 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 80-96 | 88 |
EDTA plasma (n=8) | 82-98 | 90 |
Cell culture media (n=8) | 84-98 | 91 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 95-102 | 88-97 | 93-107 |
Average (%) | 102 | 89 | 98 | |
1:4 | Range (%) | 83-96 | 88-97 | 85-94 |
Average (%) | 87 | 95 | 93 | |
1:8 | Range (%) | 97-105 | 96-105 | 87-96 |
Average (%) | 100 | 103 | 94 | |
1:16 | Range (%) | 85-97 | 81-96 | 92-101 |
Average (%) | 88 | 88 | 94 |