产品名称 | Human cTnT/TNNT2(Troponin T Type 2, Cardiac) ELISA Kit | 反应种属 | Human |
Uniprot ID | P45379 | 别称 | CMH2, CMPD2, LVNC6, RCM3, TnTC, Troponin T Type 2, Cardiac |
检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 18.75 pg/mL |
标准品 | 2000pg/mL | 检测范围 | 31.25-2000pg/mL |
样品类型 | Serum, Plasma and Other biological fluids,Sample Volume= 100μL | ||
检测时间 | 3.5小时 | 研究领域 | Cardiovascular, Cancer, Immunology |
测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人 cTnT/TNNT2抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的人 cTnT/TNNT2会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人 cTnT/TNNT2抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人 cTnT/TNNT2抗体与结合在包被抗体上的人 cTnT/TNNT2结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,人 cTnT/TNNT2浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中人 cTnT/TNNT2的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(pg/mL) | OD | Corrected |
---|---|---|
2000.00 | 3.000 | 2.912 |
1000.00 | 2.072 | 1.984 |
500.00 | 1.204 | 1.116 |
250.00 | 0.772 | 0.684 |
125.00 | 0.429 | 0.341 |
62.50 | 0.284 | 0.196 |
31.25 | 0.196 | 0.108 |
0.00 | 0.088 | 0.000 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(pg/mL) | 23.12 | 164.38 | 343.86 | 21.85 | 173.06 | 523.68 |
Standard deviation | 0.79 | 11.74 | 24.11 | 1.37 | 13.17 | 15.79 |
C V (%) | 2.59 | 5.01 | 5.91 | 4.00 | 4.30 | 3.78 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 87-99 | 93 |
EDTA plasma (n=8) | 82-95 | 88 |
Cell culture media (n=8) | 94-107 | 100 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 86-93 | 93-102 | 87-98 |
Average (%) | 88 | 94 | 94 | |
1:4 | Range (%) | 91-105 | 81-96 | 92-105 |
Average (%) | 100 | 91 | 100 | |
1:8 | Range (%) | 87-98 | 93-106 | 95-107 |
Average (%) | 91 | 99 | 101 | |
1:16 | Range (%) | 99-102 | 82-95 | 82-96 |
Average (%) | 100 | 94 | 83 |