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说明书下载产品属性/ Product Details
| 产品名称 | Human GAPDH(Glyceraldehyde-3-Phosphate Dehydrogenase) ELISA Kit | 反应种属 | Human |
| Uniprot ID | P04406 | 别称 | G3PDH,G3PD, GAPD |
| 检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 0.94 ng/mL |
| 标准品 | 100ng/mL | 检测范围 | 1.57-100ng/mL |
| 样品类型 | Tissue homogenate and Cell lysate；Sample Volume=100μL | ||
| 检测时间 | 3.5小时 | 研究领域 | Infection immunity; |
| 测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人GAPDH抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的人GAPDH会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人GAPDH抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人GAPDH抗体与结合在包被抗体上的人GAPDH结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，人GAPDH浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中人GAPDH的浓度。 | ||
技术数据/ Technical Data
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等)，标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
| (ng/mL) | OD | Corrected |
|---|---|---|
| 100.00 | 2.335 | 2.311 |
| 50.00 | 1.533 | 1.509 |
| 25.00 | 0.930 | 0.906 |
| 12.50 | 0.498 | 0.474 |
| 6.25 | 0.243 | 0.219 |
| 3.13 | 0.128 | 0.104 |
| 1.57 | 0.067 | 0.043 |
| 0.00 | 0.024 | 0.000 |
精密度
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Mean(ng/mL) | 1.80 | 13.43 | 35.67 | 2.21 | 14.50 | 32.41 |
| Standard deviation | 0.15 | 0.90 | 2.34 | 0.12 | 1.20 | 2.46 |
| C V (%) | 5.96 | 5.16 | 2.52 | 2.96 | 6.14 | 6.35 |
回收率
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围和平均回收率。
| Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
|---|---|---|
| Serum (n=8) | 94-107 | 100 |
| EDTA plasma (n=8) | 87-95 | 91 |
| Cell culture media (n=8) | 82-95 | 88 |
线性
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍，4倍，8倍，16倍做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
|---|---|---|---|---|
| 1:2 | Range (%) | 87-98 | 89-97 | 86-97 |
| Average (%) | 90 | 94 | 95 | |
| 1:4 | Range (%) | 92-104 | 85-94 | 83-96 |
| Average (%) | 104 | 89 | 89 | |
| 1:8 | Range (%) | 82-96 | 80-96 | 91-103 |
| Average (%) | 92 | 85 | 92 | |
| 1:16 | Range (%) | 95-102 | 85-99 | 96-105 |
| Average (%) | 101 | 94 | 102 |
检测流程/ Assay Procedures
