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说明书下载产品属性/ Product Details
| 产品名称 | Human NGAL(Neutrophil Gelatinase Associated Lipocalin) ELISA Kit | 反应种属 | Human |
| Uniprot ID | P80188 | 别称 | LCN2, Lipocalin 2, Oncogene 24p3, MSFI |
| 检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 0.19 ng/mL |
| 标准品 | 20ng/mL | 检测范围 | 0.31-20ng/mL |
| 样品类型 | Serum, Plasma and Other biological fluids,Sample Volume= 100μL | ||
| 检测时间 | 3.5小时 | 研究领域 | Signaling transduction, Cell biology, Cancer, Immunology, Metabolism |
| 测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人 NGAL抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的人 NGAL会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人 NGAL抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人 NGAL抗体与结合在包被抗体上的人 NGAL结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，人 NGAL浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中人 NGAL的浓度。 | ||
技术数据/ Technical Data
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等)，标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
| (ng/mL) | OD | Corrected |
|---|---|---|
| 20.00 | 3.171 | 3.147 |
| 10.00 | 2.196 | 2.172 |
| 5.00 | 1.323 | 1.299 |
| 2.50 | 0.736 | 0.712 |
| 1.25 | 0.382 | 0.358 |
| 0.63 | 0.202 | 0.178 |
| 0.32 | 0.091 | 0.067 |
| 0.00 | 0.024 | 0.000 |
精密度
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Mean(ng/mL) | 32.40 | 368.07 | 953.30 | 43.92 | 514.47 | 883.53 |
| Standard deviation | 2.16 | 13.95 | 38.96 | 2.08 | 25.62 | 35.77 |
| C V (%) | 3.66 | 5.86 | 2.50 | 5.97 | 4.09 | 7.35 |
回收率
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围和平均回收率。
| Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
|---|---|---|
| Serum (n=8) | 90-105 | 97 |
| EDTA plasma (n=8) | 97-105 | 101 |
| Cell culture media (n=8) | 95-107 | 101 |
线性
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍，4倍，8倍，16倍做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
|---|---|---|---|---|
| 1:2 | Range (%) | 95-102 | 86-95 | 85-96 |
| Average (%) | 100 | 91 | 94 | |
| 1:4 | Range (%) | 98-106 | 86-95 | 92-102 |
| Average (%) | 103 | 87 | 93 | |
| 1:8 | Range (%) | 87-98 | 93-103 | 81-93 |
| Average (%) | 96 | 97 | 84 | |
| 1:16 | Range (%) | 91-102 | 87-98 | 86-98 |
| Average (%) | 99 | 89 | 95 |
检测流程/ Assay Procedures
