产品名称 | Human IgG1(Immunoglobulin G1) ELISA Kit | 反应种属 | Human |
Uniprot ID | P01857 | 别称 | IgG1 |
检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 0.1 μg/mL |
标准品 | 10μg/mL | 检测范围 | 0.16-10μg/mL |
样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples;Sample Volume=100μL | ||
检测时间 | 3.5小时 | 研究领域 | Infection immunity; |
测试原理 | 本试剂盒采用竞争ELISA法。用人IgG2抗原包被于酶标板上,实验时加入样品(或标准品)和辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗IgG2单克隆抗体,样本(或标准品中)的IgG2与包被抗原Pg竞争结合HRP标记的抗IgG2单抗上的结合位点,形成包被抗原IgG2-HRP标记的抗IgG2单抗复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,IgG2浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中IgG2的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(μg/mL) | OD | Corrected |
---|---|---|
10.00 | 2.379 | 2.358 |
5.00 | 1.694 | 1.673 |
2.50 | 0.978 | 0.957 |
1.25 | 0.471 | 0.450 |
0.63 | 0.232 | 0.211 |
0.32 | 0.109 | 0.088 |
0.16 | 0.062 | 0.041 |
0.00 | 0.021 | 0.000 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(μg/mL) | 0.25 | 2.29 | 2.64 | 0.25 | 1.64 | 3.27 |
Standard deviation | 0.01 | 0.11 | 0.18 | 0.01 | 0.13 | 0.13 |
C V (%) | 4.86 | 6.67 | 4.10 | 6.76 | 3.92 | 6.00 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 80-92 | 86 |
EDTA plasma (n=8) | 88-103 | 95 |
Cell culture media (n=8) | 87-99 | 93 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 92-104 | 95-106 | 84-98 |
Average (%) | 96 | 95 | 92 | |
1:4 | Range (%) | 82-96 | 95-106 | 83-96 |
Average (%) | 95 | 103 | 87 | |
1:8 | Range (%) | 95-102 | 85-101 | 93-102 |
Average (%) | 101 | 85 | 99 | |
1:16 | Range (%) | 89-97 | 87-102 | 95-103 |
Average (%) | 97 | 94 | 101 |