产品名称 | Rat GIP(Gastric Inhibitory Polypeptide) ELISA Kit | 反应种属 | Rat |
Uniprot ID | Q06145 | 别称 | glucose-dependent insulinotropic polypeptide,Glucose dependent insulin releasing polypeptide |
检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 0.38 ng/mL |
标准品 | 40ng/mL | 检测范围 | 0.63-40ng/mL |
样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples;Sample Volume=100μL | ||
检测时间 | 3.5小时 | 研究领域 | Signal transduction; |
测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗大鼠GIP抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的大鼠GIP会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗大鼠GIP抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗大鼠GIP抗体与结合在包被抗体上的大鼠GIP结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,大鼠GIP浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中大鼠GIP的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(ng/mL) | OD | Corrected |
---|---|---|
40.00 | 2.404 | 2.334 |
20.00 | 1.564 | 1.494 |
10.00 | 0.890 | 0.820 |
5.00 | 0.490 | 0.420 |
2.50 | 0.270 | 0.200 |
1.25 | 0.167 | 0.097 |
0.63 | 0.120 | 0.050 |
0.00 | 0.070 | 0.000 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(ng/mL) | 1.21 | 7.38 | 19.41 | 1.05 | 7.43 | 16.42 |
Standard deviation | 0.03 | 0.31 | 0.75 | 0.05 | 0.49 | 0.87 |
C V (%) | 5.26 | 5.48 | 5.56 | 6.28 | 3.44 | 5.76 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 85-97 | 91 |
EDTA plasma (n=8) | 91-105 | 98 |
Cell culture media (n=8) | 95-107 | 101 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 96-105 | 85-92 | 86-100 |
Average (%) | 102 | 89 | 100 | |
1:4 | Range (%) | 95-103 | 80-96 | 93-108 |
Average (%) | 99 | 93 | 97 | |
1:8 | Range (%) | 95-103 | 89-100 | 80-101 |
Average (%) | 101 | 100 | 93 | |
1:16 | Range (%) | 87-98 | 85-96 | 87-96 |
Average (%) | 93 | 93 | 91 |