产品名称 | Human ADH(Antidiuretic Hormone) ELISA Kit | 反应种属 | Human |
Uniprot ID | P01185(20~28aa) | 别称 | AVP, ARVP, AVP-NPII, AVRP, VP, Vasopressin |
检测方法 | 竞争法 | 灵敏度 | 9.38 pg/mL |
标准品 | 1000pg/mL | 检测范围 | 15.63-1000pg/mL |
样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples;Sample Volume=50μL | ||
检测时间 | 1.5小时 | 研究领域 | Enzyme & Kinase; |
测试原理 | 本试剂盒采用竞争ELISA法。用人ADH抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的人ADH与包被的人ADH竞争生物素标记的抗人ADH单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,人ADH浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中人ADH的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(pg/mL) | OD |
---|---|
1000.00 | 0.302 |
500.00 | 0.402 |
250.00 | 0.596 |
125.00 | 0.857 |
62.50 | 1.152 |
31.25 | 1.547 |
15.63 | 1.861 |
0.00 | 2.525 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(pg/mL) | 29.76 | 148.28 | 460.02 | 17.06 | 150.09 | 437.99 |
Standard deviation | 2.08 | 10.29 | 21.10 | 0.92 | 7.05 | 15.22 |
C V (%) | 4.38 | 4.52 | 3.14 | 7.33 | 6.33 | 4.36 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 83-99 | 95 |
EDTA plasma (n=8) | 85-97 | 91 |
Cell culture media (n=8) | 85-97 | 91 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 87-95 | 89-97 | 85-99 |
Average (%) | 88 | 96 | 86 | |
1:4 | Range (%) | 85-97 | 89-97 | 86-98 |
Average (%) | 88 | 94 | 92 | |
1:8 | Range (%) | 89-101 | 85-94 | 91-103 |
Average (%) | 89 | 88 | 92 | |
1:16 | Range (%) | 85-97 | 80-96 | 85-97 |
Average (%) | 94 | 90 | 96 |