产品名称 | Human Ang1-7(Angiotensin 1-7) ELISA Kit | 反应种属 | Human |
Uniprot ID | P01019(34~40aa) | 别称 | Angiotensin 1-7 |
检测方法 | 竞争法 | 灵敏度 | 9.38 pg/mL |
标准品 | 1000pg/mL | 检测范围 | 15.63-1000pg/mL |
样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples;Sample Volume=50μL | ||
检测时间 | 1.5小时 | 研究领域 | Reproductive science; |
测试原理 | 本试剂盒采用竞争ELISA法。用人Ang1-7抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的人Ang1-7与包被的人Ang1-7竞争生物素标记的抗人Ang1-7单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,人Ang1-7浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中人Ang1-7的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(pg/mL) | OD |
---|---|
1000.00 | 0.257 |
500.00 | 0.357 |
250.00 | 0.551 |
125.00 | 0.812 |
62.50 | 1.107 |
31.25 | 1.502 |
15.63 | 1.816 |
0.00 | 2.480 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(pg/mL) | 51.26 | 201.56 | 487.33 | 27.31 | 228.28 | 455.00 |
Standard deviation | 0.10 | 7.73 | 20.75 | 1.03 | 10.31 | 20.67 |
C V (%) | 4.36 | 5.28 | 4.86 | 4.46 | 6.02 | 6.91 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 95-105 | 100 |
EDTA plasma (n=8) | 80-95 | 87 |
Cell culture media (n=8) | 92-105 | 98 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 95-103 | 85-93 | 89-97 |
Average (%) | 100 | 91 | 92 | |
1:4 | Range (%) | 80-96 | 85-93 | 84-102 |
Average (%) | 89 | 86 | 87 | |
1:8 | Range (%) | 87-98 | 96-103 | 87-103 |
Average (%) | 96 | 96 | 95 | |
1:16 | Range (%) | 85-92 | 97-105 | 97-104 |
Average (%) | 91 | 102 | 97 |