产品名称 | Human Ang-Ⅱ(Angiotensin Ⅱ) ELISA Kit | 反应种属 | Human |
Uniprot ID | P01019(34~41aa) | 别称 | Angiotensin-2 |
检测方法 | 竞争法 | 灵敏度 | 18.75 pg/mL |
标准品 | 2000pg/mL | 检测范围 | 31.25-2000pg/mL |
样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples;Sample Volume=50μL | ||
检测时间 | 1.5小时 | 研究领域 | Endocrinology;Reproductive science;Hormone metabolism; |
测试原理 | 本试剂盒采用竞争ELISA法。用人Ang-Ⅱ抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的人Ang-Ⅱ与包被的人Ang-Ⅱ竞争生物素标记的抗人Ang-Ⅱ单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,人Ang-Ⅱ浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中人Ang-Ⅱ的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(pg/mL) | OD |
---|---|
2000.00 | 0.219 |
1000.00 | 0.355 |
500.00 | 0.570 |
250.00 | 0.904 |
125.00 | 1.332 |
62.50 | 1.724 |
31.25 | 2.100 |
0.00 | 2.540 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(pg/mL) | 118.05 | 351.410 | 503.650 | 108.44 | 449.24 | 773.740 |
Standard deviation | 0.08 | 15.00 | 43.33 | 3.29 | 15.57 | 31.28 |
C V (%) | 6.72 | 6.45 | 7.35 | 7.71 | 7.22 | 3.69 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 91-105 | 98 |
EDTA plasma (n=8) | 81-95 | 88 |
Cell culture media (n=8) | 85-97 | 91 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 85-94 | 85-102 | 95-102 |
Average (%) | 86 | 95 | 96 | |
1:4 | Range (%) | 87-103 | 85-102 | 80-97 |
Average (%) | 99 | 90 | 84 | |
1:8 | Range (%) | 97-105 | 80-92 | 96-104 |
Average (%) | 101 | 91 | 101 | |
1:16 | Range (%) | 80-90 | 87-98 | 85-93 |
Average (%) | 89 | 95 | 90 |