产品名称 | Human PCX(Podocalyxin) ELISA Kit | 反应种属 | Human |
Uniprot ID | O00592 | 别称 | GCTM-2 antigen, Gp200, Podocalyxin-like protein 1, PC, PCLP-1, PODXL, PCLP, PCLP1 |
检测方法 | 竞争法 | 灵敏度 | 0.1 ng/mL |
标准品 | 10ng/mL | 检测范围 | 0.16-10ng/mL |
样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples;Sample Volume=50μL | ||
检测时间 | 1.5小时 | 研究领域 | Metabolic pathway;Tumor immunity;Infection immunity;Endocrinology;Hematology;Hepatology; |
测试原理 | 本试剂盒采用竞争ELISA法。用人PCX抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的人PCX与包被的人PCX竞争生物素标记的抗人PCX单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,人PCX浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中人PCX的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(ng/mL) | OD |
---|---|
10.00 | 0.304 |
5.00 | 0.404 |
2.50 | 0.598 |
1.25 | 0.859 |
0.63 | 1.154 |
0.32 | 1.549 |
0.16 | 1.863 |
0.00 | 2.527 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(ng/mL) | 0.05 | 1.470 | 3.990 | 0.04 | 2.56 | 4.030 |
Standard deviation | 0.02 | 0.06 | 0.13 | 0.02 | 0.07 | 0.20 |
C V (%) | 5.25 | 3.33 | 5.90 | 4.31 | 3.18 | 4.23 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 80-95 | 86 |
EDTA plasma (n=8) | 80-92 | 86 |
Cell culture media (n=8) | 80-96 | 88 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 88-101 | 91-99 | 97-103 |
Average (%) | 88 | 97 | 98 | |
1:4 | Range (%) | 85-93 | 91-99 | 85-104 |
Average (%) | 90 | 98 | 93 | |
1:8 | Range (%) | 89-97 | 83-89 | 83-96 |
Average (%) | 91 | 87 | 93 | |
1:16 | Range (%) | 85-94 | 88-104 | 95-103 |
Average (%) | 87 | 94 | 101 |