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说明书下载产品属性/ Product Details
| 产品名称 | Mouse CFD(ComplementFactor D) ELISA Kit | 反应种属 | Mouse |
| Uniprot ID | P03953 | 别称 | ADN, Adipsin, DF, PFD, Factor D, Properdin Factor D Esterase |
| 检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 28.13 pg/mL |
| 标准品 | 3000pg/mL | 检测范围 | 46.88-3000pg/mL |
| 样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples；Sample Volume=100μL | ||
| 检测时间 | 3.5小时 | 研究领域 | Metabolism |
| 测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗小鼠CFD抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的小鼠CFD会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠CFD抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗小鼠CFD抗体与结合在包被抗体上的小鼠CFD结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，小鼠CFD浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中小鼠CFD的浓度。 | ||
技术数据/ Technical Data
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等)，标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
| (pg/mL) | OD | Corrected |
|---|---|---|
| 3000.00 | 2.380 | 2.338 |
| 1500.00 | 1.594 | 1.552 |
| 750.00 | 0.889 | 0.847 |
| 375.00 | 0.389 | 0.347 |
| 187.50 | 0.234 | 0.192 |
| 93.75 | 0.125 | 0.083 |
| 46.88 | 0.088 | 0.046 |
| 0.00 | 0.042 | 0.000 |
精密度
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Mean(pg/mL) | 58.82 | 593.21 | 848.25 | 67.32 | 522.15 | 1378.56 |
| Standard deviation | 3.64 | 32.71 | 58.20 | 4.57 | 37.78 | 63.56 |
| C V (%) | 5.81 | 5.90 | 4.06 | 3.67 | 4.94 | 4.56 |
回收率
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围和平均回收率。
| Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
|---|---|---|
| Serum (n=8) | 80-98 | 89 |
| EDTA plasma (n=8) | 82-94 | 88 |
| Cell culture media (n=8) | 84-98 | 91 |
线性
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍，4倍，8倍，16倍做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
|---|---|---|---|---|
| 1:2 | Range (%) | 80-92 | 87-102 | 89-97 |
| Average (%) | 81 | 90 | 93 | |
| 1:4 | Range (%) | 88-96 | 87-102 | 95-104 |
| Average (%) | 88 | 95 | 100 | |
| 1:8 | Range (%) | 80-91 | 96-105 | 87-96 |
| Average (%) | 85 | 103 | 95 | |
| 1:16 | Range (%) | 85-93 | 85-93 | 88-101 |
| Average (%) | 88 | 91 | 96 |
检测流程/ Assay Procedures
