产品名称 | Mouse EGFR(Epidermal Growth Factor Receptor) ELISA Kit | 反应种属 | Mouse |
Uniprot ID | Q01279 | 别称 | ErbB-1, ErbB1,ERBB, mENA |
检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 3.75 pg/mL |
标准品 | 400pg/mL | 检测范围 | 6.25-400pg/mL |
样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples;Sample Volume=100μL | ||
检测时间 | 3.5小时 | 研究领域 | Developmental science;Bone metabolism; |
测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗小鼠EGFR抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的小鼠EGFR会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠EGFR抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗小鼠EGFR抗体与结合在包被抗体上的小鼠EGFR结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,小鼠EGFR浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中小鼠EGFR的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(pg/mL) | OD | Corrected |
---|---|---|
400.00 | 2.403 | 2.334 |
200.00 | 1.563 | 1.494 |
100.00 | 0.889 | 0.820 |
50.00 | 0.489 | 0.420 |
25.00 | 0.269 | 0.200 |
12.50 | 0.166 | 0.097 |
6.25 | 0.119 | 0.050 |
0.00 | 0.069 | 0.000 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(pg/mL) | 8.21 | 63.53 | 164.85 | 10.40 | 97.98 | 114.59 |
Standard deviation | 0.40 | 3.71 | 6.48 | 0.35 | 4.90 | 8.20 |
C V (%) | 4.80 | 2.51 | 6.75 | 5.12 | 7.30 | 4.44 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 90-105 | 97 |
EDTA plasma (n=8) | 80-97 | 88 |
Cell culture media (n=8) | 80-92 | 85 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 84-99 | 95-104 | 86-97 |
Average (%) | 86 | 96 | 91 | |
1:4 | Range (%) | 83-95 | 95-104 | 86-93 |
Average (%) | 90 | 104 | 92 | |
1:8 | Range (%) | 83-95 | 80-92 | 91-96 |
Average (%) | 84 | 90 | 92 | |
1:16 | Range (%) | 96-101 | 82-95 | 87-98 |
Average (%) | 99 | 83 | 90 |