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说明书下载产品属性/ Product Details
| 产品名称 | Mouse Klotho(Klotho) ELISA Kit | 反应种属 | Mouse |
| Uniprot ID | O35082 | 别称 | Klotho, Kl |
| 检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 9.38 pg/mL |
| 标准品 | 1000pg/mL | 检测范围 | 15.63-1000pg/mL |
| 样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples；Sample Volume=100μL | ||
| 检测时间 | 3.5小时 | 研究领域 | Endocrinology;Reproductive science; |
| 测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗小鼠Klotho抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的小鼠Klotho会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠Klotho抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗小鼠Klotho抗体与结合在包被抗体上的小鼠Klotho结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，小鼠Klotho浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中小鼠Klotho的浓度。 | ||
技术数据/ Technical Data
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等)，标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
| (pg/mL) | OD | Corrected |
|---|---|---|
| 1000.00 | 2.468 | 2.430 |
| 500.00 | 1.588 | 1.550 |
| 250.00 | 0.895 | 0.857 |
| 125.00 | 0.460 | 0.422 |
| 62.50 | 0.251 | 0.213 |
| 31.25 | 0.145 | 0.107 |
| 15.63 | 0.094 | 0.056 |
| 0.00 | 0.038 | 0.000 |
精密度
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Mean(pg/mL) | 24.06 | 226.33 | 473.38 | 29.08 | 137.68 | 384.93 |
| Standard deviation | 1.31 | 7.32 | 17.92 | 1.36 | 11.22 | 18.16 |
| C V (%) | 5.88 | 6.06 | 4.58 | 3.08 | 2.88 | 4.78 |
回收率
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围和平均回收率。
| Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
|---|---|---|
| Serum (n=8) | 90-107 | 98 |
| EDTA plasma (n=8) | 87-99 | 93 |
| Cell culture media (n=8) | 82-98 | 90 |
线性
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍，4倍，8倍，16倍做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
|---|---|---|---|---|
| 1:2 | Range (%) | 92-106 | 85-96 | 83-103 |
| Average (%) | 104 | 93 | 84 | |
| 1:4 | Range (%) | 92-101 | 87-101 | 82-93 |
| Average (%) | 99 | 99 | 84 | |
| 1:8 | Range (%) | 80-95 | 89-102 | 86-95 |
| Average (%) | 93 | 99 | 87 | |
| 1:16 | Range (%) | 87-96 | 85-98 | 81-96 |
| Average (%) | 91 | 85 | 92 |
检测流程/ Assay Procedures
