产品名称 | Mouse SAA(SerumAmyloid A) ELISA Kit | 反应种属 | Mouse |
Uniprot ID | P05366 | 别称 | SAA1, PIG4, SAA, TP53I4, Serum amyloid A1 |
检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 75 pg/mL |
标准品 | 8000pg/mL | 检测范围 | 125-8000pg/mL |
样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples;Sample Volume=100μL | ||
检测时间 | 3.5小时 | 研究领域 | Metabolic pathway;Bone metabolism;Rheumatology; |
测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗小鼠SAA抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的小鼠SAA会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠SAA抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗小鼠SAA抗体与结合在包被抗体上的小鼠SAA结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,小鼠SAA浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中小鼠SAA的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(pg/mL) | OD | Corrected |
---|---|---|
8000.00 | 2.474 | 2.418 |
4000.00 | 1.623 | 1.567 |
2000.00 | 0.981 | 0.925 |
1000.00 | 0.473 | 0.417 |
500.00 | 0.246 | 0.190 |
250.00 | 0.136 | 0.080 |
125.00 | 0.091 | 0.035 |
0.00 | 0.056 | 0.000 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(pg/mL) | 145.57 | 1553.84 | 2186.83 | 133.44 | 2106.89 | 3225.04 |
Standard deviation | 8.48 | 67.28 | 110.53 | 13.30 | 65.95 | 131.31 |
C V (%) | 4.80 | 6.96 | 6.79 | 5.97 | 7.24 | 3.48 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 80-95 | 87 |
EDTA plasma (n=8) | 86-99 | 92 |
Cell culture media (n=8) | 82-95 | 88 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 85-92 | 88-102 | 85-94 |
Average (%) | 89 | 89 | 87 | |
1:4 | Range (%) | 82-96 | 86-92 | 92-101 |
Average (%) | 87 | 92 | 94 | |
1:8 | Range (%) | 87-98 | 91-103 | 87-96 |
Average (%) | 97 | 103 | 90 | |
1:16 | Range (%) | 93-101 | 89-97 | 82-90 |
Average (%) | 98 | 94 | 86 |