产品名称 | Mouse APLN(Apelin) ELISA Kit | 反应种属 | Mouse |
Uniprot ID | Q9R0R4 | 别称 | APEL, XNPEP2 |
检测方法 | 竞争法 | 灵敏度 | 75 pg/mL |
标准品 | 8000pg/mL | 检测范围 | 125-8000pg/mL |
样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples;Sample Volume=50μL | ||
检测时间 | 1.5小时 | 研究领域 | Cytokine;Tumor immunity;Infection immunity;Developmental science;Pulmonology;Dermatology; |
测试原理 | 本试剂盒采用竞争ELISA法。用小鼠 APLN抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的小鼠 APLN与包被的小鼠 APLN竞争生物素标记的抗小鼠 APLN单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,小鼠 APLN浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中小鼠 APLN的浓度. |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(pg/mL) | OD |
---|---|
8000.00 | 0.207 |
4000.00 | 0.364 |
2000.00 | 0.574 |
1000.00 | 0.838 |
500.00 | 1.122 |
250.00 | 1.422 |
125.00 | 1.756 |
0.00 | 2.552 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(pg/mL) | 5.18 | 1124.55 | 3604.60 | 61.82 | 1713.77 | 2332.61 |
Standard deviation | 9.34 | 62.85 | 179.47 | 15.29 | 109.94 | 120.57 |
C V (%) | 7.31 | 5.45 | 3.82 | 4.09 | 6.92 | 4.87 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 87-99 | 93 |
EDTA plasma (n=8) | 81-95 | 88 |
Cell culture media (n=8) | 87-99 | 93 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 88-99 | 95-104 | 89-103 |
Average (%) | 98 | 97 | 103 | |
1:4 | Range (%) | 86-92 | 95-104 | 85-92 |
Average (%) | 89 | 103 | 89 | |
1:8 | Range (%) | 89-103 | 87-96 | 89-96 |
Average (%) | 94 | 92 | 89 | |
1:16 | Range (%) | 97-105 | 82-96 | 90-98 |
Average (%) | 98 | 92 | 94 |