产品名称 | Mouse BK(Bradykinin) ELISA Kit | 反应种属 | Mouse |
Uniprot ID | O08677 | 别称 | BK |
检测方法 | 竞争法 | 灵敏度 | 0.94 ng/mL |
标准品 | 100ng/mL | 检测范围 | 1.57-100ng/mL |
样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples;Sample Volume=50μL | ||
检测时间 | 1.5小时 | 研究领域 | Endocrinology;Cardiovascular biology;Neuro science;Gastroenterology;Hormone metabolism;Bone metabolism; |
测试原理 | 本试剂盒采用竞争ELISA法。用小鼠 BK抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的小鼠 BK与包被的小鼠 BK竞争生物素标记的抗小鼠 BK单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,小鼠 BK浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中小鼠 BK的浓度. |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(ng/mL) | OD |
---|---|
100.00 | 0.295 |
50.00 | 0.395 |
25.00 | 0.589 |
12.50 | 0.850 |
6.25 | 1.145 |
3.13 | 1.540 |
1.57 | 1.854 |
0.00 | 2.518 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(ng/mL) | 3.68 | 19.64 | 35.78 | 2.97 | 22.15 | 47.40 |
Standard deviation | 0.24 | 0.94 | 1.99 | 0.18 | 0.70 | 2.55 |
C V (%) | 7.16 | 5.87 | 5.04 | 3.38 | 5.75 | 6.99 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 86-98 | 92 |
EDTA plasma (n=8) | 95-107 | 101 |
Cell culture media (n=8) | 82-95 | 88 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 85-92 | 98-103 | 93-102 |
Average (%) | 90 | 100 | 96 | |
1:4 | Range (%) | 97-103 | 98-103 | 85-94 |
Average (%) | 103 | 100 | 87 | |
1:8 | Range (%) | 87-98 | 86-92 | 97-106 |
Average (%) | 90 | 89 | 104 | |
1:16 | Range (%) | 95-102 | 87-93 | 92-101 |
Average (%) | 102 | 89 | 101 |