产品名称 | Mouse OXA(Orexin A) ELISA Kit | 反应种属 | Mouse |
Uniprot ID | O55241 | 别称 | Hypocretin-1 |
检测方法 | 竞争法 | 灵敏度 | 37.5 pg/mL |
标准品 | 4000pg/mL | 检测范围 | 62.5-4000pg/mL |
样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples;Sample Volume=50μL | ||
检测时间 | 1.5小时 | 研究领域 | Endocrinology;Hormone metabolism; |
测试原理 | 本试剂盒采用竞争ELISA法。用小鼠 OXA抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的小鼠 OXA与包被的小鼠 OXA竞争生物素标记的抗小鼠 OXA单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,小鼠 OXA浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中小鼠 OXA的浓度. |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(pg/mL) | OD |
---|---|
4000.00 | 0.254 |
2000.00 | 0.417 |
1000.00 | 0.657 |
500.00 | 0.974 |
250.00 | 1.267 |
125.00 | 1.587 |
62.50 | 1.857 |
0.00 | 2.679 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(pg/mL) | 49.65 | 747.15 | 1738.51 | 2.26 | 1036.97 | 2046.63 |
Standard deviation | 0.08 | 42.22 | 52.16 | 2.63 | 30.72 | 60.52 |
C V (%) | 4.48 | 3.09 | 7.47 | 5.76 | 6.60 | 7.06 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 95-107 | 101 |
EDTA plasma (n=8) | 82-95 | 88 |
Cell culture media (n=8) | 86-98 | 92 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 98-105 | 91-102 | 99-105 |
Average (%) | 100 | 98 | 103 | |
1:4 | Range (%) | 92-101 | 91-102 | 86-102 |
Average (%) | 97 | 101 | 95 | |
1:8 | Range (%) | 85-105 | 86-102 | 87-96 |
Average (%) | 89 | 96 | 92 | |
1:16 | Range (%) | 87-98 | 87-99 | 89-98 |
Average (%) | 96 | 87 | 91 |