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说明书下载产品属性/ Product Details
| 产品名称 | Rat C5a(Complement Component 5a) ELISA Kit | 反应种属 | Rat |
| Uniprot ID | N/A | 别称 | C5a |
| 检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 9.38 ng/mL |
| 标准品 | 1000ng/mL | 检测范围 | 15.63-1000ng/mL |
| 样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples；Sample Volume=100μL | ||
| 检测时间 | 3.5小时 | 研究领域 | Signal transduction;Metabolic pathway;Bone metabolism; |
| 测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗大鼠C5a抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的大鼠C5a会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗大鼠C5a抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗大鼠C5a抗体与结合在包被抗体上的大鼠C5a结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，大鼠C5a浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中大鼠C5a的浓度。 | ||
技术数据/ Technical Data
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等)，标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
| (ng/mL) | OD | Corrected |
|---|---|---|
| 1000.00 | 2.451 | 2.430 |
| 500.00 | 1.571 | 1.550 |
| 250.00 | 0.878 | 0.857 |
| 125.00 | 0.443 | 0.422 |
| 62.50 | 0.234 | 0.213 |
| 31.25 | 0.128 | 0.107 |
| 15.63 | 0.077 | 0.056 |
| 0.00 | 0.021 | 0.000 |
精密度
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Mean(ng/mL) | 21.69 | 186.31 | 359.99 | 29.59 | 211.33 | 484.42 |
| Standard deviation | 1.15 | 12.17 | 18.63 | 1.14 | 10.83 | 13.82 |
| C V (%) | 2.79 | 7.40 | 3.26 | 5.70 | 5.55 | 7.38 |
回收率
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围和平均回收率。
| Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
|---|---|---|
| Serum (n=8) | 85-99 | 92 |
| EDTA plasma (n=8) | 83-95 | 89 |
| Cell culture media (n=8) | 96-107 | 102 |
线性
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍，4倍，8倍，16倍做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
|---|---|---|---|---|
| 1:2 | Range (%) | 85-104 | 80-94 | 88-102 |
| Average (%) | 92 | 89 | 90 | |
| 1:4 | Range (%) | 87-106 | 90-99 | 96-107 |
| Average (%) | 102 | 91 | 97 | |
| 1:8 | Range (%) | 83-92 | 87-103 | 89-103 |
| Average (%) | 88 | 101 | 102 | |
| 1:16 | Range (%) | 82-90 | 83-96 | 80-95 |
| Average (%) | 84 | 96 | 83 |
检测流程/ Assay Procedures
