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说明书下载产品属性/ Product Details
| 产品名称 | Rat FN(Fibronectin) ELISA Kit | 反应种属 | Rat |
| Uniprot ID | P04937 | 别称 | FN1, CIG, ED-B, FINC, FNZ, GFND, GFND2, LETS, MSF |
| 检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 0.75 ng/mL |
| 标准品 | 80ng/mL | 检测范围 | 1.25-80ng/mL |
| 样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples；Sample Volume=100μL | ||
| 检测时间 | 3.5小时 | 研究领域 | Cardiovascular biology;Hormone metabolism; |
| 测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗大鼠FN抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的大鼠FN会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗大鼠FN抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗大鼠FN抗体与结合在包被抗体上的大鼠FN结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，大鼠FN浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中大鼠FN的浓度。 | ||
技术数据/ Technical Data
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等)，标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
| (ng/mL) | OD | Corrected |
|---|---|---|
| 80.00 | 2.441 | 2.418 |
| 40.00 | 1.590 | 1.567 |
| 20.00 | 0.948 | 0.925 |
| 10.00 | 0.440 | 0.417 |
| 5.00 | 0.213 | 0.190 |
| 2.50 | 0.103 | 0.080 |
| 1.25 | 0.058 | 0.035 |
| 0.00 | 0.023 | 0.000 |
精密度
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Mean(ng/mL) | 1.62 | 12.25 | 29.71 | 2.37 | 10.42 | 27.01 |
| Standard deviation | 0.08 | 0.63 | 1.42 | 0.11 | 0.89 | 1.84 |
| C V (%) | 3.04 | 4.56 | 3.63 | 3.47 | 4.49 | 7.44 |
回收率
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围和平均回收率。
| Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
|---|---|---|
| Serum (n=8) | 85-99 | 92 |
| EDTA plasma (n=8) | 96-107 | 102 |
| Cell culture media (n=8) | 83-95 | 89 |
线性
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍，4倍，8倍，16倍做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
|---|---|---|---|---|
| 1:2 | Range (%) | 95-104 | 92-105 | 85-94 |
| Average (%) | 96 | 96 | 92 | |
| 1:4 | Range (%) | 82-94 | 92-101 | 87-101 |
| Average (%) | 87 | 96 | 97 | |
| 1:8 | Range (%) | 86-96 | 80-94 | 89-99 |
| Average (%) | 89 | 94 | 91 | |
| 1:16 | Range (%) | 81-97 | 86-101 | 85-95 |
| Average (%) | 95 | 94 | 95 |
检测流程/ Assay Procedures
