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说明书下载产品属性/ Product Details
| 产品名称 | Rat HSP-70/HSPA9(Heat Shock Protein 70) ELISA Kit | 反应种属 | Rat |
| Uniprot ID | P48721 | 别称 | HSPA9, CSA, GRP-75, GRP75, HSPA9B, MOT, MOT2, MTHSP75, PBP74, HSP70 |
| 检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 0.19 ng/mL |
| 标准品 | 20ng/mL | 检测范围 | 0.32-20ng/mL |
| 样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples；Sample Volume=100μL | ||
| 检测时间 | 3.5小时 | 研究领域 | Developmental science; |
| 测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗大鼠HSP-70/HSPA9抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的大鼠HSP-70/HSPA9会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗大鼠HSP-70/HSPA9抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗大鼠HSP-70/HSPA9抗体与结合在包被抗体上的大鼠HSP-70/HSPA9结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，大鼠HSP-70/HSPA9浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中大鼠HSP-70/HSPA9的浓度。 | ||
技术数据/ Technical Data
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等)，标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
| (ng/mL) | OD | Corrected |
|---|---|---|
| 20.00 | 2.334 | 2.284 |
| 10.00 | 1.540 | 1.490 |
| 5.00 | 0.909 | 0.859 |
| 2.50 | 0.426 | 0.376 |
| 1.25 | 0.247 | 0.197 |
| 0.63 | 0.147 | 0.097 |
| 0.32 | 0.100 | 0.050 |
| 0.00 | 0.050 | 0.000 |
精密度
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Mean(ng/mL) | 0.47 | 4.67 | 7.57 | 0.38 | 3.36 | 7.90 |
| Standard deviation | 0.03 | 0.21 | 0.37 | 0.02 | 0.14 | 0.50 |
| C V (%) | 2.69 | 6.81 | 4.12 | 7.37 | 7.24 | 5.13 |
回收率
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围和平均回收率。
| Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
|---|---|---|
| Serum (n=8) | 82-95 | 88 |
| EDTA plasma (n=8) | 88-102 | 95 |
| Cell culture media (n=8) | 80-95 | 87 |
线性
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍，4倍，8倍，16倍做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
|---|---|---|---|---|
| 1:2 | Range (%) | 93-106 | 82-96 | 93-105 |
| Average (%) | 101 | 84 | 103 | |
| 1:4 | Range (%) | 83-95 | 86-98 | 87-103 |
| Average (%) | 93 | 96 | 87 | |
| 1:8 | Range (%) | 88-103 | 93-101 | 85-103 |
| Average (%) | 94 | 96 | 95 | |
| 1:16 | Range (%) | 83-97 | 82-101 | 82-96 |
| Average (%) | 87 | 98 | 88 |
检测流程/ Assay Procedures
