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说明书下载产品属性/ Product Details
| 产品名称 | Rat LEP(Leptin) ELISA Kit | 反应种属 | Rat |
| Uniprot ID | P50596 | 别称 | LEPD, OB, OBS, Obesity Homolog |
| 检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 0.1 ng/mL |
| 标准品 | 10ng/mL | 检测范围 | 0.16-10ng/mL |
| 样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples；Sample Volume=100μL | ||
| 检测时间 | 3.5小时 | 研究领域 | Signal transduction; |
| 测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗大鼠LEP抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的大鼠LEP会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗大鼠LEP抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗大鼠LEP抗体与结合在包被抗体上的大鼠LEP结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，大鼠LEP浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中大鼠LEP的浓度。 | ||
技术数据/ Technical Data
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等)，标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
| (ng/mL) | OD | Corrected |
|---|---|---|
| 10.00 | 2.391 | 2.358 |
| 5.00 | 1.706 | 1.673 |
| 2.50 | 0.990 | 0.957 |
| 1.25 | 0.483 | 0.450 |
| 0.63 | 0.244 | 0.211 |
| 0.32 | 0.121 | 0.088 |
| 0.16 | 0.074 | 0.041 |
| 0.00 | 0.033 | 0.000 |
精密度
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Mean(ng/mL) | 0.22 | 2.48 | 3.86 | 0.23 | 1.78 | 3.83 |
| Standard deviation | 0.02 | 0.08 | 0.13 | 0.01 | 0.09 | 0.17 |
| C V (%) | 5.63 | 6.12 | 6.61 | 6.37 | 2.74 | 5.26 |
回收率
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围和平均回收率。
| Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
|---|---|---|
| Serum (n=8) | 80-90 | 84 |
| EDTA plasma (n=8) | 89-107 | 98 |
| Cell culture media (n=8) | 87-99 | 93 |
线性
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍，4倍，8倍，16倍做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
|---|---|---|---|---|
| 1:2 | Range (%) | 80-101 | 80-92 | 88-97 |
| Average (%) | 97 | 84 | 96 | |
| 1:4 | Range (%) | 87-96 | 83-96 | 96-103 |
| Average (%) | 95 | 93 | 103 | |
| 1:8 | Range (%) | 96-105 | 87-98 | 86-92 |
| Average (%) | 96 | 95 | 88 | |
| 1:16 | Range (%) | 95-103 | 95-102 | 89-97 |
| Average (%) | 100 | 100 | 94 |
检测流程/ Assay Procedures
