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说明书下载产品属性/ Product Details
| 产品名称 | Rat NFKB-p65(Nuclear Factor Kappa B p65) ELISA Kit | 反应种属 | Rat |
| Uniprot ID | N/A | 别称 | NFKB3, p65, RelA |
| 检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 46.88 pg/mL |
| 标准品 | 5000pg/mL | 检测范围 | 78.13-5000pg/mL |
| 样品类型 | Tissue homogenate and Cell lysate；Sample Volume=100μL | ||
| 检测时间 | 3.5小时 | 研究领域 | Infection immunity; |
| 测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗大鼠NFKB-p65抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的大鼠NFKB-p65会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗大鼠NFKB-p65抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗大鼠NFKB-p65抗体与结合在包被抗体上的大鼠NFKB-p65结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，大鼠NFKB-p65浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中大鼠NFKB-p65的浓度。 | ||
技术数据/ Technical Data
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等)，标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
| (pg/mL) | OD | Corrected |
|---|---|---|
| 5000.00 | 2.482 | 2.435 |
| 2500.00 | 1.626 | 1.579 |
| 1250.00 | 0.960 | 0.913 |
| 625.00 | 0.441 | 0.394 |
| 312.50 | 0.232 | 0.185 |
| 156.25 | 0.134 | 0.087 |
| 78.13 | 0.082 | 0.035 |
| 0.00 | 0.047 | 0.000 |
精密度
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Mean(pg/mL) | 144.07 | 1063.36 | 1627.86 | 157.03 | 777.86 | 1894.92 |
| Standard deviation | 7.16 | 49.30 | 76.93 | 8.01 | 39.09 | 75.34 |
| C V (%) | 3.55 | 5.66 | 6.53 | 3.60 | 6.14 | 5.62 |
回收率
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围和平均回收率。
| Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
|---|---|---|
| Serum (n=8) | 92-106 | 99 |
| EDTA plasma (n=8) | 87-95 | 91 |
| Cell culture media (n=8) | 80-92 | 85 |
线性
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍，4倍，8倍，16倍做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
|---|---|---|---|---|
| 1:2 | Range (%) | 85-92 | 88-102 | 95-104 |
| Average (%) | 91 | 97 | 100 | |
| 1:4 | Range (%) | 89-103 | 86-92 | 80-92 |
| Average (%) | 93 | 90 | 86 | |
| 1:8 | Range (%) | 97-105 | 81-93 | 82-95 |
| Average (%) | 99 | 84 | 85 | |
| 1:16 | Range (%) | 91-99 | 89-104 | 86-97 |
| Average (%) | 95 | 95 | 89 |
检测流程/ Assay Procedures
