产品名称 | Rat VCAM-1/CD106(Vascular Cell Adhesion Molecule 1) ELISA Kit | 反应种属 | Rat |
Uniprot ID | P29534 | 别称 | CD106 antigen, CD106, DKFZp779G2333, INCAM-100, L1CAM, MGC99561, vascular cell adhesion molecule 1, vascular cell adhesion protein 1, V-CAM 1, VCAM1, VCAM-1 |
检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 7.5 pg/mL |
标准品 | 800pg/mL | 检测范围 | 12.5-800pg/mL |
样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples;Sample Volume=100μL | ||
检测时间 | 3.5小时 | 研究领域 | Signal transduction;Neuro science; |
测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗大鼠VCAM-1/CD106抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的大鼠VCAM-1/CD106会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗大鼠VCAM-1/CD106抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗大鼠VCAM-1/CD106抗体与结合在包被抗体上的大鼠VCAM-1/CD106结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,大鼠VCAM-1/CD106浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中大鼠VCAM-1/CD106的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(pg/mL) | OD | Corrected |
---|---|---|
800.00 | 2.463 | 2.418 |
400.00 | 1.612 | 1.567 |
200.00 | 0.970 | 0.925 |
100.00 | 0.462 | 0.417 |
50.00 | 0.235 | 0.190 |
25.00 | 0.125 | 0.080 |
12.50 | 0.080 | 0.035 |
0.00 | 0.045 | 0.000 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(pg/mL) | 22.01 | 129.96 | 365.58 | 15.49 | 141.97 | 294.62 |
Standard deviation | 1.24 | 6.47 | 13.03 | 1.22 | 10.24 | 18.57 |
C V (%) | 6.70 | 2.53 | 5.91 | 7.47 | 5.69 | 3.49 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 81-97 | 89 |
EDTA plasma (n=8) | 84-97 | 90 |
Cell culture media (n=8) | 82-94 | 88 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 90-99 | 98-106 | 85-94 |
Average (%) | 96 | 106 | 86 | |
1:4 | Range (%) | 97-106 | 86-102 | 87-96 |
Average (%) | 102 | 95 | 92 | |
1:8 | Range (%) | 95-102 | 88-96 | 89-101 |
Average (%) | 98 | 90 | 90 | |
1:16 | Range (%) | 87-98 | 89-97 | 82-90 |
Average (%) | 90 | 96 | 86 |