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说明书下载产品属性/ Product Details
| 产品名称 | Rat α1-AT(Alpha 1-Antitrypsin) ELISA Kit | 反应种属 | Rat |
| Uniprot ID | P17475 | 别称 | SERPINA1, A1A, A1AT, AAT, PI, PI1, PRO2275 |
| 检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 3.75 ng/mL |
| 标准品 | 400ng/mL | 检测范围 | 6.25-400ng/mL |
| 样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples；Sample Volume=100μL | ||
| 检测时间 | 3.5小时 | 研究领域 | Enzyme & Kinase; |
| 测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗大鼠α1-AT抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的大鼠α1-AT会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗大鼠α1-AT抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗大鼠α1-AT抗体与结合在包被抗体上的大鼠α1-AT结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，大鼠α1-AT浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中大鼠α1-AT的浓度。 | ||
技术数据/ Technical Data
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等)，标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
| (ng/mL) | OD | Corrected |
|---|---|---|
| 400.00 | 2.373 | 2.334 |
| 200.00 | 1.533 | 1.494 |
| 100.00 | 0.859 | 0.820 |
| 50.00 | 0.459 | 0.420 |
| 25.00 | 0.239 | 0.200 |
| 12.50 | 0.136 | 0.097 |
| 6.25 | 0.089 | 0.050 |
| 0.00 | 0.039 | 0.000 |
精密度
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Mean(ng/mL) | 11.83 | 68.04 | 155.64 | 8.11 | 89.71 | 186.32 |
| Standard deviation | 0.52 | 2.80 | 8.16 | 0.37 | 3.96 | 10.07 |
| C V (%) | 6.99 | 6.10 | 3.65 | 3.81 | 7.75 | 7.96 |
回收率
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围和平均回收率。
| Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
|---|---|---|
| Serum (n=8) | 80-90 | 84 |
| EDTA plasma (n=8) | 85-97 | 91 |
| Cell culture media (n=8) | 80-93 | 86 |
线性
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍，4倍，8倍，16倍做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
|---|---|---|---|---|
| 1:2 | Range (%) | 85-96 | 86-101 | 92-105 |
| Average (%) | 87 | 101 | 104 | |
| 1:4 | Range (%) | 87-101 | 86-101 | 89-102 |
| Average (%) | 97 | 100 | 90 | |
| 1:8 | Range (%) | 89-102 | 86-101 | 92-101 |
| Average (%) | 90 | 92 | 95 | |
| 1:16 | Range (%) | 85-98 | 87-96 | 88-102 |
| Average (%) | 91 | 89 | 94 |
检测流程/ Assay Procedures
