产品名称 | Rat DPD(Deoxypyridinoline) ELISA Kit | 反应种属 | Rat |
Uniprot ID | O89000 | 别称 | Pyrilinks-D, deoxyPYD |
检测方法 | 竞争法 | 灵敏度 | 1.88 ng/mL |
标准品 | 200ng/mL | 检测范围 | 3.13-200ng/mL |
样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples;Sample Volume=50μL | ||
检测时间 | 1.5小时 | 研究领域 | Enzyme & Kinase;Metabolic pathway;Neuro science;Developmental science; |
测试原理 | 本试剂盒采用竞争ELISA法。用大鼠 DPD抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的大鼠 DPD与包被的大鼠 DPD竞争生物素标记的抗大鼠 DPD单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,D2D浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中D2D的浓度. |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(ng/mL) | OD |
---|---|
200.00 | 0.214 |
100.00 | 0.350 |
50.00 | 0.565 |
25.00 | 0.899 |
12.50 | 1.327 |
6.25 | 1.719 |
3.13 | 2.095 |
0.00 | 2.535 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(ng/mL) | 10.75 | 29.65 | 99.14 | 11.62 | 46.55 | 68.55 |
Standard deviation | 0.48 | 1.78 | 2.79 | 0.10 | 1.40 | 4.51 |
C V (%) | 7.04 | 5.23 | 5.03 | 3.60 | 6.83 | 5.79 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 95-107 | 101 |
EDTA plasma (n=8) | 80-93 | 86 |
Cell culture media (n=8) | 94-105 | 98 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 81-94 | 82-94 | 88-95 |
Average (%) | 88 | 85 | 95 | |
1:4 | Range (%) | 87-105 | 82-94 | 98-107 |
Average (%) | 100 | 90 | 103 | |
1:8 | Range (%) | 80-95 | 95-102 | 90-99 |
Average (%) | 91 | 100 | 94 | |
1:16 | Range (%) | 96-105 | 87-103 | 88-97 |
Average (%) | 100 | 93 | 95 |