产品名称 | Rat NPY(Neuropeptide Y) ELISA Kit | 反应种属 | Rat |
Uniprot ID | P07808 | 别称 | NP-Y, PYY4 |
检测方法 | 竞争法 | 灵敏度 | 18.75 pg/mL |
标准品 | 2000pg/mL | 检测范围 | 31.25-2000pg/mL |
样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples;Sample Volume=50μL | ||
检测时间 | 1.5小时 | 研究领域 | Hematology;Hormone metabolism; |
测试原理 | 本试剂盒采用竞争ELISA法。用大鼠 NPY抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的大鼠 NPY与包被的大鼠 NPY竞争生物素标记的抗大鼠 NPY单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,D2D浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中D2D的浓度. |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(pg/mL) | OD |
---|---|
2000.00 | 0.200 |
1000.00 | 0.336 |
500.00 | 0.551 |
250.00 | 0.885 |
125.00 | 1.313 |
62.50 | 1.705 |
31.25 | 2.081 |
0.00 | 2.521 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(pg/mL) | 102.85 | 290.14 | 579.68 | 54.29 | 350.23 | 964.11 |
Standard deviation | 4.77 | 22.75 | 30.30 | 5.61 | 13.74 | 27.13 |
C V (%) | 3.60 | 4.03 | 3.06 | 6.69 | 5.02 | 6.97 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 85-99 | 92 |
EDTA plasma (n=8) | 93-107 | 100 |
Cell culture media (n=8) | 87-99 | 93 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 90-99 | 98-106 | 89-97 |
Average (%) | 94 | 105 | 94 | |
1:4 | Range (%) | 97-106 | 98-106 | 85-94 |
Average (%) | 104 | 104 | 88 | |
1:8 | Range (%) | 95-102 | 86-102 | 87-96 |
Average (%) | 97 | 91 | 93 | |
1:16 | Range (%) | 87-98 | 88-96 | 89-101 |
Average (%) | 92 | 88 | 90 |