产品名称 | Rat BK(Bradykinin) ELISA Kit | 反应种属 | Rat |
Uniprot ID | N/A | 别称 | BK |
检测方法 | 竞争法 | 灵敏度 | 0.75 ng/mL |
标准品 | 80ng/mL | 检测范围 | 1.25-80ng/mL |
样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples;Sample Volume=50μL | ||
检测时间 | 1.5小时 | 研究领域 | Enzyme & Kinase;Infection immunity;Hepatology; |
测试原理 | 本试剂盒采用竞争ELISA法。用大鼠 BK抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的大鼠 BK与包被的大鼠 BK竞争生物素标记的抗大鼠 BK单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,D2D浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中D2D的浓度. |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(ng/mL) | OD |
---|---|
80.00 | 0.189 |
40.00 | 0.346 |
20.00 | 0.556 |
10.00 | 0.820 |
5.00 | 1.104 |
2.50 | 1.404 |
1.25 | 1.738 |
0.00 | 2.534 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(ng/mL) | 4.15 | 11.19 | 21.85 | 4.77 | 14.26 | 40.92 |
Standard deviation | 0.02 | 0.64 | 1.66 | 0.15 | 0.67 | 1.86 |
C V (%) | 6.99 | 7.40 | 6.44 | 7.60 | 2.78 | 3.59 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 90-105 | 97 |
EDTA plasma (n=8) | 97-105 | 101 |
Cell culture media (n=8) | 95-107 | 101 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 95-102 | 86-95 | 85-96 |
Average (%) | 100 | 91 | 94 | |
1:4 | Range (%) | 98-106 | 86-95 | 92-102 |
Average (%) | 103 | 87 | 93 | |
1:8 | Range (%) | 87-98 | 93-103 | 81-93 |
Average (%) | 96 | 97 | 84 | |
1:16 | Range (%) | 91-102 | 87-98 | 86-98 |
Average (%) | 99 | 89 | 95 |