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说明书下载产品属性/ Product Details
| 产品名称 | Rat CRH(Corticotropin Releasing Hormone) ELISA Kit | 反应种属 | Rat |
| Uniprot ID | P01143 | 别称 | CRF, Corticoliberin |
| 检测方法 | 竞争法 | 灵敏度 | 0.19 ng/mL |
| 标准品 | 20ng/mL | 检测范围 | 0.32-20ng/mL |
| 样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples；Sample Volume=50μL | ||
| 检测时间 | 1.5小时 | 研究领域 | Enzyme & Kinase; |
| 测试原理 | 本试剂盒采用竞争ELISA法。用大鼠 CRH抗原包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的大鼠 CRH与包被的大鼠 CRH竞争生物素标记的抗大鼠 CRH单抗上的结合位点，游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素，生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，D2D浓度与OD450值之间呈反比，通过绘制标准曲线计算出样品中D2D的浓度. | ||
技术数据/ Technical Data
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等)，标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
| (ng/mL) | OD |
|---|---|
| 20.00 | 0.190 |
| 10.00 | 0.326 |
| 5.00 | 0.541 |
| 2.50 | 0.875 |
| 1.25 | 1.303 |
| 0.63 | 1.695 |
| 0.32 | 2.071 |
| 0.00 | 2.511 |
精密度
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Mean(ng/mL) | 0.74 | 3.69 | 6.11 | 0.24 | 5.10 | 6.06 |
| Standard deviation | 0.01 | 0.19 | 0.27 | 0.04 | 0.15 | 0.32 |
| C V (%) | 6.68 | 6.87 | 2.65 | 3.22 | 7.16 | 3.29 |
回收率
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围和平均回收率。
| Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
|---|---|---|
| Serum (n=8) | 84-97 | 90 |
| EDTA plasma (n=8) | 80-97 | 88 |
| Cell culture media (n=8) | 80-92 | 85 |
线性
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍，4倍，8倍，16倍做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
|---|---|---|---|---|
| 1:2 | Range (%) | 89-97 | 87-101 | 87-105 |
| Average (%) | 97 | 90 | 87 | |
| 1:4 | Range (%) | 85-94 | 87-101 | 80-95 |
| Average (%) | 86 | 99 | 89 | |
| 1:8 | Range (%) | 93-102 | 91-104 | 96-105 |
| Average (%) | 100 | 94 | 97 | |
| 1:16 | Range (%) | 93-106 | 82-94 | 95-102 |
| Average (%) | 95 | 84 | 99 |
检测流程/ Assay Procedures
