产品名称 | Rat GC(Glucagon) ELISA Kit | 反应种属 | Rat |
Uniprot ID | G3V6P5 | 别称 | Carbohydrate-Rich Portion of Platelet Membrane Glycoprotein Ib Alpha Polypeptide |
检测方法 | 竞争法 | 灵敏度 | 37.5 pg/mL |
标准品 | 4000pg/mL | 检测范围 | 62.5-4000pg/mL |
样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples;Sample Volume=50μL | ||
检测时间 | 1.5小时 | 研究领域 | Cytokine;Tumor immunity;Bone metabolism; |
测试原理 | 本试剂盒采用竞争ELISA法。用大鼠 GC抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的大鼠 GC与包被的大鼠 GC竞争生物素标记的抗大鼠 GC单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,D2D浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中D2D的浓度. |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(pg/mL) | OD |
---|---|
4000.00 | 0.242 |
2000.00 | 0.405 |
1000.00 | 0.645 |
500.00 | 0.962 |
250.00 | 1.255 |
125.00 | 1.575 |
62.50 | 1.845 |
0.00 | 2.667 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(pg/mL) | 137.50 | 944.35 | 1470.88 | 47.93 | 1088.89 | 1740.32 |
Standard deviation | 6.04 | 49.31 | 78.34 | 8.48 | 39.84 | 76.16 |
C V (%) | 7.37 | 7.05 | 2.60 | 4.03 | 3.38 | 2.96 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 85-99 | 92 |
EDTA plasma (n=8) | 80-92 | 85 |
Cell culture media (n=8) | 80-90 | 84 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 88-101 | 89-97 | 85-96 |
Average (%) | 91 | 96 | 93 | |
1:4 | Range (%) | 90-98 | 89-97 | 95-104 |
Average (%) | 90 | 92 | 102 | |
1:8 | Range (%) | 92-106 | 85-97 | 93-102 |
Average (%) | 93 | 86 | 96 | |
1:16 | Range (%) | 85-97 | 87-96 | 80-94 |
Average (%) | 94 | 88 | 85 |