产品名称 | Mouse D2D(D-Dimer) ELISA Kit | 反应种属 | Mouse |
Uniprot ID | N/A | 别称 | D-Dimer, D dimer, D2D |
检测方法 | 竞争法 | 灵敏度 | 46.88 ng/mL |
标准品 | 5000ng/mL | 检测范围 | 78.13-5000 ng/mL |
样品类型 | Plasma and Other biological fluids; Sample volume=50μL | ||
检测时间 | 1.5小时 | 研究领域 | Enzyme & Kinase;Metabolic pathway;Neuro science;Developmental science; |
测试原理 | 本试剂盒采用竞争ELISA法。用小鼠D2D抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的小鼠D2D与包被的小鼠D2D竞争生物素标记的抗小鼠D2D单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,D2D浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中D2D的浓度. |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(ng/mL) | OD |
---|---|
5000.00 | 0.162 |
2500.00 | 0.300 |
1250.00 | 0.519 |
625.00 | 0.850 |
312.50 | 1.271 |
156.25 | 1.728 |
78.13 | 2.037 |
0.00 | 2.517 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(ng/mL) | 22.92 | 1230.33 | 2221.93 | 208.57 | 1262.65 | 1476.97 |
Standard deviation | 5.58 | 59.88 | 122.37 | 12.33 | 37.11 | 93.26 |
C V (%) | 4.50 | 7.24 | 6.68 | 3.34 | 4.19 | 7.78 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 82-95 | 88 |
EDTA plasma (n=8) | 94-107 | 100 |
Cell culture media (n=8) | 87-99 | 93 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 87-98 | 89-99 | 96-101 |
Average (%) | 88 | 95 | 97 | |
1:4 | Range (%) | 83-94 | 89-99 | 88-95 |
Average (%) | 90 | 91 | 91 | |
1:8 | Range (%) | 85-98 | 83-99 | 98-107 |
Average (%) | 97 | 98 | 102 | |
1:16 | Range (%) | 85-97 | 98-105 | 90-99 |
Average (%) | 93 | 105 | 90 |