产品名称 | MEK(Methionine-Enkephalin) ELISA Kit | 反应种属 | Universal |
Uniprot ID | N/A | 别称 | Met-enkephalin, Opioid growth factor, OGF |
检测方法 | 竞争法 | 灵敏度 | 75.00 pg/mL |
标准品 | 8000 pg/mL | 检测范围 | 125.00-8000 pg/mL |
样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenates, Cell lysates, Cell culture supernates and Other biological fluids; Sample Volume=50μL | ||
检测时间 | 1.5小时 | 研究领域 | Signal Transduction |
测试原理 | 本试剂盒采用竞争ELISA法。用MEK抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的MEK与包被的MEK竞争生物素标记的抗MEK单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,MEK浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中MEK的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(pg/mL) | OD |
---|---|
8000.00 | 0.197 |
4000.00 | 0.354 |
2000.00 | 0.564 |
1000.00 | 0.828 |
500.00 | 1.112 |
250.00 | 1.412 |
125.00 | 1.746 |
0.00 | 2.542 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(pg/mL) | 157.48 | 336.13 | 2247.19 | 163.93 | 251.57 | 2797.20 |
Standard deviation | 16.78 | 37.08 | 116.07 | 20.89 | 46.16 | 144.48 |
C V (%) | 5.18 | 4.80 | 3.22 | 6.02 | 5.12 | 3.11 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 92-107 | 99 |
EDTA plasma (n=8) | 93-107 | 100 |
Cell culture media (n=8) | 87-99 | 93 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 81-94 | 95-102 | 91-102 |
Average (%) | 89 | 99 | 98 | |
1:4 | Range (%) | 83-96 | 95-102 | 88-97 |
Average (%) | 93 | 100 | 95 | |
1:8 | Range (%) | 87-98 | 98-106 | 86-97 |
Average (%) | 88 | 98 | 94 | |
1:16 | Range (%) | 85-97 | 87-98 | 85-103 |
Average (%) | 87 | 93 | 100 |