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说明书下载产品属性/ Product Details
| 产品名称 | 3-NT(3-Nitrotyrosine) ELISA Kit | 反应种属 | Universal |
| Uniprot ID | N/A | 别称 | 3-Nitro-L-Tyrosine; 3-Nitrotyrosine; Nitrotyrosine |
| 检测方法 | 竞争法 | 灵敏度 | 1.35 ng/mL |
| 标准品 | 300 ng/mL | 检测范围 | 4.69-300 ng/mL |
| 样品类型 | Serum, Plasma and Other biological fluids; Sample Volume=50μL | ||
| 检测时间 | 1.5小时 | 研究领域 | Metabolic pathway;Infection immunity;Rheumatology; |
| 测试原理 | 本试剂盒采用竞争ELISA法。用3-NT抗原包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的3-NT与包被的3-NT竞争生物素标记的抗3-NT单抗上的结合位点，游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素，生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，3-NT浓度与OD450值之间呈反比，通过绘制标准曲线计算出样品中3-NT的浓度。 | ||
技术数据/ Technical Data
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等)，标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
| (ng/mL) | OD |
|---|---|
| 300.00 | 0.235 |
| 150.00 | 0.357 |
| 75.00 | 0.535 |
| 37.50 | 0.819 |
| 18.75 | 1.128 |
| 9.38 | 1.496 |
| 4.69 | 1.769 |
| 0.00 | 2.517 |
精密度
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Mean(ng/mL) | 5.91 | 12.61 | 84.27 | 6.15 | 9.43 | 104.90 |
| Standard deviation | 0.63 | 1.39 | 4.35 | 0.78 | 1.73 | 5.42 |
| C V (%) | 5.31 | 4.59 | 2.51 | 5.77 | 4.96 | 3.22 |
回收率
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围和平均回收率。
| Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
|---|---|---|
| Serum (n=8) | 89-103 | 96 |
| EDTA plasma (n=8) | 83-97 | 90 |
| Cell culture media (n=8) | 86-99 | 92 |
线性
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍，4倍，8倍，16倍做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
|---|---|---|---|---|
| 1:2 | Range (%) | 86-93 | 92-101 | 80-96 |
| Average (%) | 87 | 94 | 92 | |
| 1:4 | Range (%) | 93-101 | 92-101 | 95-103 |
| Average (%) | 98 | 100 | 101 | |
| 1:8 | Range (%) | 85-98 | 87-98 | 80-96 |
| Average (%) | 91 | 92 | 95 | |
| 1:16 | Range (%) | 90-101 | 85-92 | 93-106 |
| Average (%) | 93 | 87 | 99 |
检测流程/ Assay Procedures
