产品名称 | NE(Noradrenaline) ELISA Kit | 反应种属 | Universal |
Uniprot ID | N/A | 别称 | NA; NAd; Norepinephrine; Norepi |
检测方法 | 竞争法 | 灵敏度 | 26.1 pg/mL |
标准品 | 5000 pg/mL | 检测范围 | 78.13-5000 pg/mL |
样品类型 | Serum, Plasma, Cell lysates, Cell culture supernates and Other biological fluids; Sample Volume=50μL | ||
检测时间 | 1.5小时 | 研究领域 | Signal transduction;Infection immunity;Neuro science;Hormone metabolism; |
测试原理 | 本试剂盒采用竞争ELISA法。用NE抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的NE与包被的NE竞争生物素标记的抗NE单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,NE浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中NE的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(pg/mL) | OD |
---|---|
5000.00 | 0.188 |
2500.00 | 0.326 |
1250.00 | 0.545 |
625.00 | 0.876 |
312.50 | 1.297 |
156.25 | 1.754 |
78.13 | 2.063 |
0.00 | 2.543 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(pg/mL) | 98.43 | 210.08 | 1404.49 | 102.46 | 157.23 | 1748.25 |
Standard deviation | 10.49 | 23.18 | 72.55 | 13.05 | 28.85 | 90.30 |
C V (%) | 6.48 | 7.44 | 3.47 | 3.87 | 5.52 | 4.60 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 85-99 | 92 |
EDTA plasma (n=8) | 80-92 | 85 |
Cell culture media (n=8) | 80-90 | 84 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 88-102 | 81-94 | 86-97 |
Average (%) | 96 | 84 | 92 | |
1:4 | Range (%) | 96-107 | 81-94 | 80-94 |
Average (%) | 106 | 90 | 89 | |
1:8 | Range (%) | 89-103 | 80-90 | 90-99 |
Average (%) | 93 | 84 | 95 | |
1:16 | Range (%) | 80-95 | 83-95 | 87-103 |
Average (%) | 80 | 85 | 100 |