当前位置：
说明书下载产品属性/ Product Details
| 产品名称 | VB2(Vitamin B2) ELISA Kit | 反应种属 | Universal |
| Uniprot ID | N/A | 别称 | Riboflavin; Riboflavine |
| 检测方法 | 竞争法 | 灵敏度 | 2.55 ng/mL |
| 标准品 | 600 ng/mL | 检测范围 | 9.38-600 ng/mL |
| 样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenates, Cell lysates, Cell culture supernates and Other biological fluids; Sample Volume=50μL | ||
| 检测时间 | 1.5小时 | 研究领域 | Nutrition metabolism;Hormone metabolism; |
| 测试原理 | 本试剂盒采用竞争ELISA法。用VB2抗原包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的VB2与包被的VB2竞争生物素标记的抗VB2单抗上的结合位点，游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素，生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，VB2浓度与OD450值之间呈反比，通过绘制标准曲线计算出样品中VB2的浓度。 | ||
技术数据/ Technical Data
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等)，标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
| (ng/mL) | OD |
|---|---|
| 600.00 | 0.197 |
| 300.00 | 0.375 |
| 150.00 | 0.614 |
| 75.00 | 0.859 |
| 37.50 | 1.184 |
| 18.75 | 1.543 |
| 9.38 | 1.788 |
| 0.00 | 2.548 |
精密度
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Mean(ng/mL) | 11.81 | 25.21 | 168.54 | 12.30 | 18.87 | 209.79 |
| Standard deviation | 1.26 | 2.78 | 8.71 | 1.57 | 3.46 | 10.84 |
| C V (%) | 4.71 | 4.56 | 3.32 | 4.58 | 7.21 | 3.75 |
回收率
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围和平均回收率。
| Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
|---|---|---|
| Serum (n=8) | 80-94 | 87 |
| EDTA plasma (n=8) | 95-107 | 101 |
| Cell culture media (n=8) | 82-95 | 88 |
线性
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍，4倍，8倍，16倍做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
|---|---|---|---|---|
| 1:2 | Range (%) | 88-102 | 90-99 | 82-97 |
| Average (%) | 93 | 97 | 86 | |
| 1:4 | Range (%) | 93-105 | 90-99 | 88-103 |
| Average (%) | 101 | 91 | 103 | |
| 1:8 | Range (%) | 91-99 | 95-106 | 83-94 |
| Average (%) | 98 | 106 | 84 | |
| 1:16 | Range (%) | 83-96 | 87-101 | 92-105 |
| Average (%) | 91 | 100 | 100 |
检测流程/ Assay Procedures
