产品名称 | AA(Arachidonic Acid) ELISA Kit | 反应种属 | Universal |
Uniprot ID | N/A | 别称 | ARA |
检测方法 | 竞争法 | 灵敏度 | 0.94 μg/mL |
标准品 | 200 μg/mL | 检测范围 | 3.13-200 μg/mL |
样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenates, Cell lysates, Cell culture supernates and Other biological fluids; Sample Volume=50μL | ||
检测时间 | 1.5小时 | 研究领域 | Signal transduction;Metabolic pathway;Endocrinology;Neuro science;Hormone metabolism;Bone metabolism; |
测试原理 | 本试剂盒采用竞争ELISA法。用AA抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的AA与包被的AA竞争生物素标记的抗AA单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,AA浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中AA的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(μg/mL) | OD |
---|---|
200.00 | 0.174 |
100.00 | 0.310 |
50.00 | 0.525 |
25.00 | 0.859 |
12.50 | 1.287 |
6.25 | 1.679 |
3.13 | 2.055 |
0.00 | 2.495 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(μg/mL) | 3.94 | 8.40 | 56.18 | 4.10 | 6.29 | 69.93 |
Standard deviation | 0.42 | 0.93 | 2.90 | 0.52 | 1.15 | 3.61 |
C V (%) | 3.32 | 4.48 | 4.15 | 4.02 | 4.92 | 2.50 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 90-105 | 97 |
EDTA plasma (n=8) | 88-102 | 95 |
Cell culture media (n=8) | 87-97 | 90 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 92-105 | 89-98 | 92-103 |
Average (%) | 97 | 94 | 94 | |
1:4 | Range (%) | 92-101 | 89-98 | 86-97 |
Average (%) | 100 | 94 | 87 | |
1:8 | Range (%) | 80-94 | 81-94 | 83-96 |
Average (%) | 85 | 91 | 85 | |
1:16 | Range (%) | 86-101 | 96-105 | 91-103 |
Average (%) | 89 | 104 | 99 |