产品名称 | LXA4(Lipoxin A4) ELISA Kit | 反应种属 | Universal |
Uniprot ID | N/A | 别称 | LX-A4 |
检测方法 | 竞争法 | 灵敏度 | 0.47 ng/mL |
标准品 | 50 ng/mL | 检测范围 | 0.78-50 ng/mL |
样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenates, Cell culture supernates and Other biological fluids; Sample Volume=50μL | ||
检测时间 | 1.5小时 | 研究领域 | Signal transduction;Metabolic pathway;Infection immunity; |
测试原理 | 本试剂盒采用竞争ELISA法。用LXA4抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的LXA4与包被的LXA4竞争生物素标记的抗LXA4单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,LXA4浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中LXA4的浓度。 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(ng/mL) | OD |
---|---|
50.00 | 0.270 |
25.00 | 0.433 |
12.50 | 0.673 |
6.25 | 0.990 |
3.13 | 1.283 |
1.56 | 1.603 |
0.78 | 1.873 |
0.00 | 2.695 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean(ng/mL) | 787.40 | 1680.67 | 11235.96 | 819.67 | 1257.86 | 13986.01 |
Standard deviation | 83.90 | 185.42 | 580.37 | 104.44 | 230.80 | 722.42 |
C V (%) | 5.04 | 6.38 | 5.64 | 5.52 | 7.10 | 2.27 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 87-95 | 91 |
EDTA plasma (n=8) | 96-107 | 102 |
Cell culture media (n=8) | 80-96 | 87 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 95-103 | 88-98 | 85-94 |
Average (%) | 98 | 90 | 87 | |
1:4 | Range (%) | 87-98 | 88-98 | 95-103 |
Average (%) | 96 | 95 | 102 | |
1:8 | Range (%) | 85-92 | 87-103 | 80-97 |
Average (%) | 87 | 101 | 80 | |
1:16 | Range (%) | 80-96 | 89-97 | 93-102 |
Average (%) | 86 | 92 | 93 |